24 分光光度分析法.ppt

§1 概 述 §2 光吸收的基本定律 §3 分光光度计简介 §4 分光光度法的建立 §5 分光光度法的应用 §1 概 述 分光光度法：在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为分光光度法。 二、物质对光的选择性吸收 1、物质的颜色 2、朗伯-比耳定律 §3 显色反应和测量条件的选择 一、显色反应及显色条件的选择 显色反应：将试样中被测组分转变成有色化合物的反应。 显色剂：把被测组分转变成有色化合物的试剂。 条件试验的简单方法 变动某实验条件，固定其余条件，测定一系列吸光度值，绘制吸光度—某实验条件的曲线，根据曲线确定某实验条件的适宜值或适宜范围。 §4 分光光度计简介 吸光度A与显色剂用量 cR的关系曲线如图所 示。 选择曲线变化平坦处作为显色条件。 显色剂用量范围为ca~cb R ⑵.溶液的pH值 pH1 pH2 pH3 A1 A2 A3 横坐标 纵坐标 由实验确定。 方法：在相同实验条件下，分别测定不同pH值条件下显色溶液的吸光度。 ① 影响金属离子的存在状态，酸度低时会水解或沉淀。 ② 影响显色剂的浓度和颜色，很多显色剂为有机弱酸。 ③ 影响配合物的组成,配合物逐级配位，酸度不同， 配位比不同。 酸度范围为pH 2~10 pH A 选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的pH范围。 ⑷.显色时间与稳定性 有些显色反应瞬间完成，溶液颜色很快达到稳定状态，并在较长时间内保持不变；有些显色反应虽能迅速完成，但有色络合物的颜色很快开始褪色；有些显色反应进行缓慢，溶液颜色需经一段时间后才稳定。 通过实验确定。 ⑶. 温度 显色反应一般在室温下进行，有的反应需加热，应通过实验找出适宜的温度范围。 显色时间为15min 稳定时间45min 二、干扰的消除 例：测定Ti4＋， 加入H3PO4掩蔽剂使Fe3+(黄色)成为［Fe(PO４)2］3-(无色)，消除Fe3+的干扰；又如用铬天青S光度法测定Al3+时，加入抗坏血酸作掩蔽剂将Fe3+还原为Fe2+，消除Fe3+的干扰。 　　选择掩蔽剂的原则是：掩蔽剂不与待测组分反应；掩蔽剂本身及掩蔽剂与干扰组分的反应产物不干扰待测组分的测定。 1.加入掩蔽剂 2.控制溶液的酸度　　 　　通过控制适宜的酸度，使干扰组分不与显色剂作用。如用二苯硫腙测定Hg2+时，在稀酸中进行，可消除Cd2+,Cu2+等离子干扰。 3.选择适宜的波长 　　避开干扰物的最大吸收。例MnO4-的最大吸收波长525nm，干扰物Cr2O72-在此也有吸收，可选用次灵敏波长545nm. A ? 待测组分 5.分离干扰离子 　　采用适当的分离方法预先除去干扰物质。 4.利用参比溶液 配制适当的参比液，消除干扰组分的影响。 1.选择适当的入射波长 一般应该选择?max为入射光波长。但如果?max处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。 ?max 三、测量条件的选择 原则：吸收最大干扰最小 A ? 待测组分 2. 吸光度范围的选择 吸光度在0.2~0.8 透光率 15% ~ 65% A=0.434 或T=36.8% 测量的相对误差最小 3. 参比溶液的选择 吸收池表面对入射光有反射和吸收作用；溶液的不均匀性所引起的散射；过量显色剂、其它试剂、溶剂等引起的吸收，这些因素影响待测组分透光度或吸光度的测量。 采用参比溶液校正的方法消除或减小这些影响。在相同的吸收池中装入参比溶液(又称空白溶液)，调节仪器使透过参比池的吸光度为零(称为工作零点)。在此条件下测得的待测溶液的吸光度才真正反映其吸光强度。 光源 单色器 吸收池 检测器 A或T读数 * * 第十二章 分光光度法 §1 概 述 一、分光光度法的特点 二、物质对光的选择性吸收 三、光吸收曲线 主要有: 红外分光光度：分子振动光谱，吸收光波长范围 2.5?1000?m，主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外分光光度：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。 可见分光光度：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400?750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 一、分光光度法的特点 （1）灵敏度高； （2）准确度高； （3）操作简便、快速； （4）应用广泛。 可见光：波长在400~750nm范围内的光为可见光。 红（620~750）、