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实验四 细菌的简单染色和 细菌的革兰氏染色 一、目的 1、学习微生物涂片、染色的基本技术； 2、掌握细菌的简单染色和革兰氏染色； 3、了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分 类鉴定中的重要性； 4、巩固显微镜油镜的使用方法。 二、基本原理 革兰氏染色法是由丹麦医生C.Gram于1884年发明，是细菌学中最重要的鉴别染色法。 革兰氏染色法的基本步骤是：先用初染剂结晶紫进行染色，再用碘液媒染，然后用乙醇脱色，最后用复染剂复染。各种细菌经革兰氏染色法染色后，能区分成两大类，一类最终染成紫色，称革兰氏阳性细菌（G＋），另一类被染成红色，称革兰氏阴性细菌（G－）。 革兰氏染色阴性 革兰氏染色阳性 三、器材 1、菌种 大肠杆菌、四联球菌 12～18h营养琼脂斜面培养物； 2、染色剂 革兰氏染色液 3、仪器或其他用具 光学显微镜、酒精 灯、 载玻片、香柏油、二甲苯、 擦镜纸、牙签。 四、操作步骤 1、细菌的简单染色 用牙签挑取少许牙垢涂片、固定、干燥 染色1～2min 水洗、干燥、镜检。 2、细菌的革兰氏染色 在无菌操作下用接种环挑取少许细菌斜面 培养物涂片、固定、干燥、初染1分钟 媒染1分钟 脱色20～30s 复染1分钟、水洗、干燥、镜检。 五、实验报告 1、绘图示你自己牙垢的细菌形态图； 2、说明染色观察各菌的形状、颜色和革兰 氏染色反应； 3、思考题 见实验教材（老）P.30～31 第（1）、（4）和（6）题。 六、预习 细菌鞭毛染色及其运动的观察 * *
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