2016分子标记的种类.pptVIP

SRAP的技术流程 1.引物的选择 大小 ：17~18bp 上游引物：在5’端前10个是填充序列，接着是CCGG，3’端是3个选择碱基。 下游引物:在5’端前11个是填充序列，接着是AATT，3’端是3个选择碱基。 引物的设计原则： ·它们不能形成发夹结构或其他耳机结构 ·G、C含量在40~50% ·上游和下游的填充序列长度在10或11个碱基，二者必须不同 2.DNA扩增 模板：基因组DNA或者cDNA 方法：复性变温法 扩增程序： 3.凝胶电泳以及扩增产物检测 1.2.6双脱氧化指纹法 (Dideoxy Fingerprints，ddF) ddF是将双脱氧末端终止测序法与SSCP结合起来的分析技术，对由双脱氧末端终止的长短不一的单链DNA进行SSCP分析。如果目的片段存在一个突变，则所有大于某一大小对应于突主变位置的双脱氧终止片段无野生型系统，对于每一个突有多次机会检测其迁移率改变，提高了检测突变的效率。ddF方法克服了SSCP分析时因DNA长度影响SSCP显示的困难，通过一种双脱氧核昔酸生产特异性的单链DNA，使其中长度合适的DNA片段显示SSCP改变。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NE