细菌的单染色.pptxVIP

微生物学实验（一）概述 油镜的使用 细菌的形态观察指导老师：冯翊果老师 和 谷峻老师 Tel：156 2640 8384E-mail：fengyg@scnu.edu.cn本次课的内容总体要求和安全规范实验安排和成绩的评定第一次实验： 油镜的使用 细菌形态观察 总体要求进实验室须穿实验服，不得穿拖鞋、短裤或者裙子，不得在实验室内进食，不得喧哗；实验前预习，尽量熟悉实验内容；实验中规范操作、及时记录；垃圾丢到垃圾盒内，保持实验室整洁；实验器具和公用试剂用完后，应立即放回原处 ；实验过程保证安全独立完成实验报告保证安全酒精灯装量不得超过2/3，也不得少于1/3，不得用酒精灯点燃另一台酒精灯，酒精失火时用湿布掩盖，或者使用灭火器；用电炉时一定要垫石棉网；使用高压灭菌锅时一定要有专人看管；使用紫外线时，注意防护：不可裸眼注视，不可在紫外线下直接操作。拔除保险栓，握紧把手，对准火焰喷射。实验报告姓名、班级和学号实验题目实验原理（略写）实验操作（ 略写）实验结果（重点）画图(注明图标、放大倍数、各部分名称）文字描述分析和讨论（重点）思考题母细胞芽体液泡酿酒酵母形态结构（100× 10），美蓝染色法 实验安排与成绩评定实验安排第02~15周基础实验第16周考核成绩评定平时成绩：50分，包括出勤、实验操作、课堂表现和实验报告 综合实验：50分基础实验安排第1-2次，细菌的制片和形态观察 第3、10次，细菌的革兰氏染色；酵母菌形态结构观察；第4-6次，丝状微生物（霉菌和放线菌）制片与形态结构的观察微生物制片染色技术微生物显微观察技术培养基配制消毒灭菌技术第7次，培养基的制备和消毒灭菌 微生物无菌接种、分离、纯化技术第8次，微生物无菌接种、分离和纯化微生物数量测定微生物培养技术微生物生长研究方法第9次，水中细菌总数测定第11次， 细菌的生理生化实验第12次， 环境对微生物生长的影响 第3次、馒头的制作和甜酒的酿制微生物实际应用第一次实验 细菌的形态观察 教学目标或要求：1、学习和掌握显微镜油镜的正确使用；2、观察和区分细菌的3种形态（球菌、短杆菌、长杆菌）；显微镜油镜的使用放大倍数数值口径（NA）显微镜油镜的重要参数盖玻片厚度镜筒长度显微镜油镜头的识别工作距离mm油镜物镜的工作原理使用油质作为玻片与接物镜之间的介质——油浸系可以增加显微镜的放大倍数能分辨的两点之间最小距离D可以增加视野的照明度可以增大显微镜的分辨率油镜的使用方法和注意事项0、注意区分油镜和高倍镜，二者混用将导致经济损失！！ （￥7999.84 --1992年购 ）1、用低倍镜对光。最大光圈2、低倍镜观察（寻找观察目标），适当缩小光圈3、高倍镜观察（选取理想的观察目标）。4、油镜观察（特别注意需要来回调整光圈大小以获得最佳的视野明暗对比）5、观察完毕后，降下载物台，转动转换器，使油镜头位于前方，用干净擦镜纸擦去镜头上的石蜡油。(如使用香柏油，需再取一张擦镜纸醮上二甲苯擦去镜头上残留的香柏油，最后再用一张干净的擦镜纸擦去残留在镜头上的二甲苯；）。6、将显微镜各部分还原，放回箱中，做好记录，锁好箱门。如何用油镜观察？高倍镜下，把目标移到视野中心。在载玻片上加一小滴油降下载物台，转换油镜。用细螺旋调节，使物象出现，并调节光源亮度和光圈，使成像清晰。小心地升起载物台，使油滴和油镜头刚好接触。观察并记录细菌简述单细胞、无分支的原核微生物；大小：大多直径1 μm左右三种形态：球菌、短杆菌、长杆菌（演示）细菌的制片与染色染 料：①碱性染料（basic dye）—带正电染料。其阳离子部分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。如结晶紫沙黄, 甲基蓝,碱性复红等。②酸性染料（Acid dye）—带负电染料。其阴离子部分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。如刚果红、酸性复红 等。③脂溶性染料—如Sudan black。 细菌的制片与单染色干燥固定涂片细菌的制片水洗、干燥染色1~2min镜检实验内容 用显微镜油镜观察苏云金杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌装片（S、J、D）。记录图像。记录各个镜头的工作距离。问题是否可以不经过低倍镜—高倍镜，而直接用油镜观察？金黄色葡萄球菌：球菌，直径~1μm 苏云金芽孢杆菌：长杆菌，有时呈链状排列）实验报告将观察结果拍照分析讨论和作业列举《实验指导》中出现的10种危险药品，并列出其危害、应急处理方法和保存注意事项（表格形式）。请写出酒精灯、显微镜（包括油镜）使用过程中的注意事项，并配图说明。请配图描述本次实验观察的三种形态细菌，说明它们在显微镜观察结果中，形态上的区别。根据细菌的大小和植物细胞大小比较，在显微镜不同放大倍数下观察到的细菌应该是怎样的情况？如何判断观察到的是目标菌而不是杂质？观察目标不在视野内没有调好焦距用油镜不能观察到目标镜头不