第十六章 心肌损伤标志物检验.PPTVIP

第十六章 心肌损伤标志物检验 第一节 概 述 第二节 心肌损伤标志 物的选择与评价 第三节 心肌损伤标志 物测定 第一节 概 述 第三节 心脏标志物的测定 本章小结 （二）心肌肌钙蛋白（cTn） 作为心肌损伤标志物，在临床上已应用了多年（1987年用于AMI的诊断）。由于其高度的心肌特异性，对于心肌损伤的高度敏感性及较长的诊断窗口期，cTnI 已被国外临床医生及检验人员广泛接受，正逐渐取代CK－MB，成为判断心肌损伤，特别是诊断AMI的“金标准” 。 在心肌细胞膜完整状态下，cTnI、cTnT不能透过细胞膜进入血循环，故健康人血内不含或含极低量的cTnI和cTnT，当心肌缺血缺氧，发生变性坏死，细胞膜破损时，cTnI、cTnT弥散进入细胞间质，较早地出现在外周血中。心肌肌钙蛋白在发病后出现较早（4小时），持续时间长（4～10天），而且对心肌损伤的敏感性和特异性都较高，故是目前诊断AMI较好的确定标志物。1994～1995年cTnT、cTnI分别被美国食品及药品管理局（ FDA ）批准用于临床AMI诊断。 （三）CK-MB质量 1985年，Chan等首先报道了CK-MB质量分析的方法。CK-MB质量分析的方法测定其蛋白浓度（μg/L），避免了活力测定方法中可能遇到（如巨CK等）的干扰。CK-MB质量分析方法采用抗CK-M抗体和抗CK-B抗体或采用CK-MB抗体，适合于自动化分析，具有高度的灵敏性（最低检测限μg/L）和准确性，测定时间短（最快仅需7min），明显优于其他分析测定CK-MB的方法，1990年后逐渐被广泛接受。 心肌损伤标志物的选择 心肌损伤标志物依其特点的不同可分为： 1.早期标志物 指在症状出现6小时内血液升高的标志物。Mb、CK、CK-MB、cTnT和cTnI可作为早期标志物，其中Mb是AMI发生后最早出现的标志物，AMI发生后0.5～2小时升高，CK和CK-MB是3～8小时，cTnT和cTnI是3～6小时。 2. 中晚期标志物 对症状发生后2～3天或更长时间的病人，可选择中晚期标志物进行测定。LDH及其同工酶、cTnT和cTnI可作为中晚期标志物，AMI发生后，LDH及其同工酶升高可维持6～10天，cTnI可维持5～7天，cTnT可维持10～15天。而早期标志物Mb仅维持18～30小时，CK和CK-MB维持2～3天。 3. 排除标志物 可作为排除标志物的有Mb、cTnT和cTnI，Mb在症状出现早期为阴性一般可排除AMI，但症状出现晚期Mb阴性不能排除AMI，同样，中晚期cTnT和cTnI不升高也不能完全排除AMI。 4. 确证标志物 是指在症状出现后6～12小时升高，并能维持异常升高数天，且具有较高的灵敏度和特异性的标志物。cTnT和cTnI是目前认为最好的确证标志物。 蛋白类标志物虽优于心肌酶类标志物，但测定花费较高，而心肌酶分析价格低廉、方法成熟，也不失为有效的AMI辅助诊断指标。 一、肌酸激酶的测定 （一）测定方法简介 CK测定的方法有化学法、酶法、荧光法和化学发光法，在临床上广泛应用的有化学法和酶法。 1. 肌酸显色法 在肌酸激酶的催化下，磷酸肌酸与ADP反应生成肌酸和ATP，生成的肌酸与双乙酰、α-萘酚直接结合生成红色化合物。 磷酸肌酸＋ADP 肌酸＋ATP 肌酸＋双乙酰＋α-萘酚 红色化合物 540 nm CK 酶活力单位定义：1ml血清在37℃与底物作用1h产生1μmol肌酸为1个CK活性单位，若将此单位乘以1000/60可换算成国际单位（U/L）。 方法简便，试剂易得，灵敏度能满足临床要求，但特异性较低，显色不稳定。 2.酶偶联法 在CK的催化下，磷酸肌酸与ADP反应生成肌酸和ATP；随即在己糖激酶（HK）催化下，生成的ATP使葡萄糖磷酸化为6-磷酸葡萄糖（G6P）；再在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下（G6PDH），6-磷酸葡萄糖与NADP+反应，生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH；在340nm波长下，监测NADPH的生成速率。 【参考范围】 男性：46~171U/L(37℃) 女性：34~145 U/L(37℃) 【注意事项】 1.总CK测定值超过