第六章 植物器官培养课件.ppt

(二)病毒在植物体内的分布 4.发育方式： * * 未受精胚珠 受精胚珠 愈伤组织 发育成种子 大孢子或卵分化为单倍体植株 再生植株 (四)子房培养 * * 1.取材： 开花前1－5天摘下未授粉子房； 或授粉后摘下子房。 2.灭菌： 材料处理(禾谷类植物用70%酒精擦洗幼穗；双子叶植物花蕾用饱和漂白粉灭菌15分) → →70%浸30秒→ →无菌水冲洗→ → 0.1%升汞15－20分钟→ →无菌水冲洗→ →无菌滤纸吸干。 3.接种： 无菌条件下剥开幼花，夹出子房并接种于培养基（MS、N6等）。 4.培养： 温度26℃,相对湿度50-60%，16h散射光。 * * 胚乳是由两个单倍的极核和一个单倍的精子结合而成的三倍体组织。 由它可获得无子结实的三倍体植株，进而可将它加倍成六倍体植株。 * * (五)胚乳的培养 培养方法： 1. 取材与接种 取授粉4-8d后的幼果→常规消毒→在无菌条件下切开果实 → 取出种子 → 分离出胚乳 → 接种 2. 培养基: MS、White + 2，4-D（NAA0.5-2.0 ） + 6-BA0.1-1.0mg/L * * 3.培养 在25-27℃和黑暗条件或散射光下培养约6-l0d胚乳开始膨大→形成愈伤组织→分化培养基上（ 附加6-BA 0.5-3.0mg/L及少量的NAA ）培养→ 待愈伤组织长出芽后，切下不定芽→生根培养基→光下培养10-15d，切口处可长出白色的不定根。 * * 1. 材料选择及灭菌 取植物的幼嫩叶片，切割成适当大小（2—3cm），在流水中冲洗干净。再用70％酒精浸泡约10s →→饱和漂白粉液中浸3-15min，或在0.1％升汞中浸3-5min →→无菌水冲洗数次→→无菌的干滤纸上吸干水分→→接种。 注：细嫩与成熟叶片消毒时间不同 * * 2.接种 外植体大小：0.5cm2 薄片（叶柄、子叶） 上表皮朝上接种培养基。最好带叶脉，注意极性 * * 3.培养 （1）培养基： MS、B5、White 、N6；蔗糖3%； 2.4－D利于愈伤组织形成，NAA抑制芽形成，利于根发生，KT、6-BA利于芽形成。 愈伤组织诱导：BA 1-3mg/L,NAA 0.25-1mg/L； 分化培养：CTK 2 mg/L； 生根培养：NAA 0.5－1.0 mg/L * * (2)培养过程： 培养约2周至4周→→形成愈伤组织→→再分化培养基上（附加6-BA 2mg／L ）进行分化培养→→约10d左右，愈伤组织开始转绿出现绿色芽点→→发育成无根苗→→生根培养基（附加 NAA0.5-l mg/L ） →→发育形成完整植株。 * * (3)培养条件： 温度：25±2℃ 光照时间：10-12h， 光照强度：1500-3000 Lx 。 * * 叶的培养比胚，茎尖和茎段培养难度大。 首先要选用易培养成功的叶组织，如幼叶比成熟叶易培养，子叶比叶片易培养。 其次要添加适当的生长素和细胞分裂素，保证利于叶组织的脱分化和再分化。 * * 第三节 生殖器官的培养 * * 一、花器官的培养 二、种子的培养 三、胚胎的培养* * * 一、花器官的培养 1. 定义： 花器官培养指整个花器及其组成部分如花托、花瓣、花丝、花柄、子房、花药等的无菌培养。 * * 一、花器官的培养（花蕾） 2、意义： 通过离体花芽培养可了解整体植物和内源激素在花芽性别决定中所起的作用 可以了解花器各部分对果实和种子发育的作用 内、外源激素在果实种子发育过程中的调控作用 生产上也可用于珍贵品种的扩大繁殖。 * * * * 二、种子培养 * * 定义： 种子培养是指受精后发育完全的成熟种子和发育不完全的未成熟种子的无菌培养。 2. 意义 ： 可以打破种子休眠， 促进萌发； 通过胚胎拯救解决远缘杂种败育性，产生后代； 快速繁殖苗木 优点：植株分化容易， 无菌操作方便 * * 定义：植物胚胎培养是指对植物的胚(幼胚、成熟胚)、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植株的技术。 * * 三、胚胎的培养* 胚胎培养已有近百年的历史： 1904年的Haning最早成功地培养了萝卜和辣椒的胚， 并萌发形成小苗。 30年代成功地把兰科植物的胚培养成小植株。 40年代在苹果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、马铃薯、 甘蓝与大白菜的种间杂种的胚胎培养、胚乳培养 及子房与胚珠培养均取得了不同程度的进展 * * （一）胚胎培养的意义 克服远缘杂种的不育性 ；