第10章发酵染菌及其防治(免费阅读).pptVIP

所谓发酵染菌是指在发酵过程，生产菌以外的其他微生物侵入了发酵系统，从而使发酵过程失去真正意义上的纯种培养。 国外抗生素发酵染菌率为2%~5%，国内的青霉素发酵染菌率2%，链霉素、红霉素和四环素发酵染菌率约为5%;谷氨酸发酵噬菌体(Phage）感染率1%~2%。 第一节 染菌对发酵的影响 一、染菌对不同发酵过程的影响 二、染菌发生的不同时间对发酵的影响 三、染菌程度对发酵的影响 由于各种发酵过程所用的微生物菌种、培养基以及发酵的条件、产物的性质不同，染菌造成的危害程度也不同。 不管是对于哪种发酵过程，一旦发生染菌，都会由于培养基中的营养成分被消耗或代谢产物被分解，严重影响到产物的生成，使发酵产品的产量大为降低。 二、染菌发生的不同时间对发酵的影响 不同的染菌时期对发酵所产生的影响也是有区别的。 种子培养期染菌 发酵前期染菌 发酵中期染菌 发酵后期染菌 １、种子培养染菌后的异常现象 菌体浓度异常 理化指标异常 代谢异常 1 显微镜检查法 2 肉汤培养法 3 平板划线培养或斜面培养检查法 4 双层平板培养法 此法主要是用在噬菌体检查上。培养基组成根据实际情况可以变动。培养基灭菌后冷却至45~50℃，以无菌操作倒人平皿内，每只平皿倒人培养基8~10 mL左右，下层培养基凝固后，移入32℃恒温箱内空白培养48 h后，检查无菌备用;无菌操作下，用接种环刮取斜面菌苔混在5 mL无菌生理盐水中，作为指示菌备用;吸取5 mL待测样品和0.5mL指示菌液于无菌空白试管内，倒人事先溶解好的冷却至45~50℃的装有5 mL上层培养基的试管中，混合后倒人下层平板中，冷却后于32℃恒温下培养20 h，观察有无噬菌斑。 由于无菌试验取样少，从取样到得出结果耗时长，因此不能完全依赖于无菌检查来判断染菌的发生。 在生产中，应当结合发酵过程中发生的种种异常现象来进行判断。 第三节　杂菌污染的途径和防治 严格控制无菌室的污染。根据生产工艺的要求和特点，建立相应的无菌室，交替使用各种灭菌手段对无菌室进行处理。 在制备种子时对沙土管、斜面、三角瓶及摇瓶均严格进行管理，防止杂菌的进入而受到污染。 对每一级种子的培养物均应进行严格的无菌检查，确保任何一级种子均未受杂菌感染后才能使用。 对菌种培养基或器具进行严格的灭菌处理，保证在利用灭菌锅进行灭菌前，先完全排除锅内的空气，以免造成假压，是灭菌的温度达不到要求，造成灭菌的不彻底而使种子染菌。 　　　要杜绝无菌空气带菌，就必须从空气的净化工艺和设备的设计、过滤介质的选用和添装、过滤介质的灭菌和管理等方面完善空气净化系统。 防治措施 盘管：仔细清洗，检查渗漏，及时发现及时处理，杜绝污染。 空气分布管：采取频繁更换空气分布管和认真洗涤等措施。 发酵罐体：采取罐内壁涂刷防腐材料、加强清洗并定期铲除污垢、加强罐体清洗等措施。 管道：采取合理的管道安装、配置，减少“死角”染菌。 ①具有非常专一的寄生性。 ②不耐热性。 ③pH的稳定性。 ④嗜氧性。 ⑤对干燥的稳定性 ⑥不耐药性 （五）、发酵罐中污染噬菌体后的抢救 A、并罐法 利用噬菌体只能在处于生长繁殖期细胞中增值的特点，当发现发酵罐初期污染噬菌体时，可采取并罐法。即将其他罐批发酵16~18 h小时左右的发酵液，以等体积混合后分别发酵，利用其活力旺盛的种子，不进行加热灭菌，亦不需另行补种，便可正常发酵。 B、选育抗噬菌体的菌种，或轮换使用菌种 发现噬菌体后停搅拌、小通风，降低pH值，立即培养要轮换的菌种或抗性种子，培养好后接入发酵罐，并补加1/3正常量的玉米浆、磷盐和镁盐。 （五）、发酵罐中污染噬菌体后的抢救 C、放罐重消法 发现噬菌体后，放罐，调pH值，补加1/2正常量的玉米浆和1/3正常量的水解糖，适当降低温度重新灭菌，接入2%的种子，继续发酵。 D、罐内灭噬菌体法： 发现噬菌体停搅拌、小通风，将发酵液加热到70~80℃杀死噬菌体。冷却后，接种发酵。 中科院制定生物质资源科技发展六项战略路径 中国科学院2010年6月１０日发布中国至２０５０年生物质资源科技发展路线图，制定６项战略路径促进中国由生物质资源大国向生物质资源及生物经济强国转变。 路线图提出，要系统认知生物界的生物物质资源、功能性资源、基因资源和生物智能资源，通过６项主要战略路径的研究，确保国家未来生物质资源可持续利用，为中国２１世纪生物资源科技、生物产业和生物经济的发展提供资源安全保障，实现中国由生物质资源大国向生物质资源及生物经济强国的根本转变。 加强光合作用机理与提高作物及能源植物光能利用效率研究，建成我国可持续生物能源的研发体系，最终实现我国生物再生能源技术规模化应用和商业化； 加强生物质能源研究，建立能源植物繁育和生产基地，优化规模种植及加工生产体系并提高生物质能源的品级