Real-timePCR综述.pptVIP

实时PCR的简介与发展历程 实时PCR技术的概念 DNA交联荧光染料技术 SYBR GreenⅠ染料 DNA交联荧光染料技术的评价 外参照系统的缺点 标准品生物线性范围往往难以满足所有被检样本的检测需要 无法控制标准品与被检样品之间扩增效率的差异 无法纠正被检样本的抽提速率和抽提质量的差异（可以通过设置内参照系统进行纠正） 内参照系统 * EB染色：溴化乙锭 信噪比（snr)：值越大，噪音越小。 此法不应用于多重qPCR中 探针：课本37页 2011级 目录 四.荧光共振能量转移技术（掌握） 六.参照系统（熟悉） 二.实时PCR的定义（掌握） 三.DNA交联荧光染料技术（掌握） 一.实时PCR的简介与发展历程（了解） 五.几个概念（掌握） 七.应用、优点、局限性（了解） 1986年末 Russ Higuchi来到PCR的诞生地Cetus公司工作 ，探讨“闭管PCR”的可能“溴化乙锭”的使用，光导纤维的使用。1991年Cetus公司的Holland等在Proc Natl Acad Sci U S A 上发表了TaqMan? probes技术。 1993年美国Applied Biosystems, Division of Perkin-Elmer 的Lee 等在Nucleic Acids Research杂志上发表了使用双荧光标记的实时荧光PCR方法