6700例宫颈脱落细胞HPV基因分型检测的临床分析.docVIP

6700例宫颈脱落细胞HPV基因分型检测的临床分析 　　【摘 要】目的：探讨宫颈脱落细胞HPV亚型（C-HPV-S）在宫颈癌早期诊断和宫颈上皮内瘤变（CIN）术后随访中的价值。方法：选择2008年1月至2011年9月在济南军区总医院检查C-HPV-S的6700例，包括查体者1344例（体检组）和因患妇科疾病就诊者5356例（患者组），受检者均行宫颈薄层液基细胞学检查（TCT）并采用导流杂交基因芯片技术行C-HPV-S检测。对其中病理诊断为CIN者行宫颈环形电切术（LEEP），术后6个月、1～2年随访时行TCT和C-HPV-S检查。结果：①体检组和患者组HPV感染率分别为17.8% 和6.0%（P0.05）。②本组宫颈炎、CIN I-II、CIN III、宫颈癌的HPV感染率分别为28.8%、80.8%、90.5%、97.5%（P0.05）。④对CIN患者LEEP后1～2年随访，CIN I-II组复发率为1.2%（4/335），HPV持续感染率为3.9%（13/274）； CIN III组复发率4.4%（6/137），HPV持续感染率为9.5%（13/124）。两组复发率有显著差异（P0.05），两组HPV持续感染率CIN III组高于CIN I-II（P0.05）。结论：C-HPV-S有助于早期发现和预测CIN，也可作为CIN术后随访的重要指标，为预防宫颈癌的发生提供干预依据。 　　【关键词】人乳头瘤病毒；基因分型；宫颈癌；宫颈上皮内瘤变；随访 　　【中图分类号】R737 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2012）12-0019-03 　　人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是一种环状的双链DNA病毒，已证实HPV感染是宫颈癌的主要致病因素[1-3]，且各亚型致病性不同。目前已经发现100多种不同亚型的HPV，采用Munoz高危型（HR-HPV）和低危型HPV（LR-HPV）的流行病学分类[4]：HR-HPV包括HPV16、18、31等， LR-HPV包括HPV6、11、40、42等。LR-HPV常在湿疣等病变中发现，也可在低度宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia.CIN ）CIN I中检出，而HR-HPV则常在CIN II、CIN III和宫颈癌中发现。国际癌症研究所（IARC）提出HPV检测筛查宫颈癌时必须考虑不同亚型HPV致癌性的差异[5]。本文旨在探讨宫颈脱落细胞HPV亚型（cervical cytology HPV subtypes， C-HPV-S）感染与不同宫颈病变等因素的关系，进一步阐明C-HPV-S在宫颈癌筛查和CIN 宫颈电环切除术（cervical loop electrosurgical excision procedure.LEEP）后随访中的价值。 　　1 对象与方法 　　1.1 研究对象 本组C-HPV-S检查纳入和排除标准：①查体组为宫颈柱状上皮异位（cervical columnar ectopy. CCE）及其他宫颈疾病症者；②患者组为有宫颈异常并出现分泌物异常、接触性出血等症状和可疑尖锐湿疣者；③宫颈薄层液基细胞学检查（TCT）和或宫颈活检病理学异常者。本组选择2008年1月至2011年9月在济南军区总医院妇产科就诊符合上述纳入条件检查C-HPV-S的6700例，包括查体者1344例（体检组）和因患妇科疾病就诊者5356例（患者组），年龄分别为39.5±16.5岁和42.5±15.5岁，病情分布见表1。受检者均行TCT和采用导流杂交基因芯片技术进行C-HPV-S（共21种基因型）检测， 对TCT结果为未明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞（ASCUS）级别以上者行宫颈活检病理检查，病理学为最终诊断标准。两组中472例病理诊断为CIN者（分为两组：CIN I-II、CIN III）均行宫颈LEEP治疗，术后6个月和1～2年随访行C-HPV-S及TCT检查，对术后1～2年HPV阳性者及TCT结果异常者再行宫颈活检病理检查。本研究已征得被检者当事人知情同意，并得到本院伦理委员会批准。 　　1.2 宫颈脱落细胞标本采集 常规暴露宫颈，用宫颈刷在宫颈外口内2cm顺时针旋转5圈，然后将宫颈刷放入装有专用细胞保存液的样本瓶中，受检者检查前3天未做阴道冲洗，未使用阴道内药物。 　　1.3 HPV基因分型检测 使用凯普生物化学有限公司生产的HPV分型检测试剂盒，采用导流杂交基因芯片技术进行C-HPV-S检测。经过标本DNA的提取、PCR扩增、核酸分子导流杂交及显色，最后结果判读，包括15种HR-HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68）和6种LR-HP