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类风湿关节炎实验动物模型研究综述 　　【摘 要】 类风湿关节炎动物模型一直是研究的重点，提供与人类风湿关节炎类似的动物模型，有助于深入研究本病的发病机制和治疗策略。然而，不同的动物模型特点也不尽相同，应根据实验需求选择合适的模型。通过整理目前国内外类风湿关节炎模型研究，综述几种常用的实验性类风湿关节炎模型的建立方法、发病机制和特点，以期为类风湿关节炎的深入研究及防治提供依据。 　　【关键词】 关节炎，类风湿；动物模型；实验；综述 　　doi：10.3969/j.issn.2095-4174.2015.12.019 　　类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以滑膜的持续增生、软骨及骨破坏的病理学特征为主的自身免疫性疾病，主要以慢性炎症、多发关节肿胀、疼痛及其引起的关节僵硬，甚至功能丧失为临床表现[1]。其病因和发病机制尚不明了。本文对几种常用的类风湿关节炎模型的建立、发病机制及特点做一综述，为更好地研究其机制以及寻求防治方法提供依据。 　　1 佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）模型 　　AA是比较经典的RA动物模型[2]。弗氏佐剂包括不完全佐剂（incomplete Frennd adjuvant，IFA） 　　和完全佐剂（Freunds complete adjuvant，CFA）。 　　CFA是将减毒卡介苗（BCG）10 mg经80 ℃水浴灭活1 h，与高压灭菌的液体石蜡和无水羊毛脂的混合液1 mL充分乳化混匀制成。此法多用大鼠。 　　1.1 造模方法 在消毒后的大鼠足跖皮下注入已经乳化混匀的CFA，浓度为10 mg?mL-1，每侧注射0.1 mL。原发病变主要是注射部位的炎症表现，踝关节及足跖部红肿，可侵及足垫、全足。继发病变则呈现对侧踝关节和前足肿胀，呈不断加重趋势，耳朵和尾根部出现“关节炎”结节，这些表现与人RA类似[3]。病理改变表现为关节周围及软组织的炎症，可造成滑膜增生，血管翳形成，软骨破坏，后期关节间隙变窄，关节粘连，以致形成不可逆的改变。 　　1.2 发病机制 AA的发病机制主要为分子模拟理论。关节软骨的自身抗原Hsp60与结核杆菌中一个相对分子量为65 ku热休克蛋白（Hsp65）结构高度相似，可以通过分子模拟或交叉反应，被同一株T细胞克隆识别，进一步引起自身的免疫反应[4]。有研究表明，T淋巴细胞免疫功能异常在RA的发生和发展中起着重要作用。AA造模成功后，检测指标中CD3+、CD4+、CD8+下降，CD4+/CD8+升高，表现有明显的免疫功能紊乱现象，提示T细胞亚群紊乱是AA大鼠的病理机制之一[5]。另一方面，细胞因子在AA发病的免疫调节中也起着核心的作用[6]。有研究证实，AA的发病过程中有氧化应激反应发生[7]，发病过程中产生大量的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）[8]。Stoop等[9]研究表明，佐剂的选择可影响Th1和Th17细胞的总比例，而不一定影响细胞因子的产生以及疾病的发生率和严重的水平。 　　1.3 特 点 AA模型制备方法简单易行，在临床表现、病理学及免疫学上与人RA有很多相似之处，所以被普遍应用于RA相关研究。但AA缺乏慢性病理过程，与RA的病变过程不尽相同。如只用AA模型研究RA，局限性较大，所以，还需要参照其他模型从多个方面综合考虑。 　　2 胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis，CIA） 　　模型 　　1977年，Trentham等[10]根据动物可被Ⅱ型胶原诱导产生免疫性关节炎这一理论，初次成功建立了由Ⅱ型胶原诱导的大鼠实验性关节炎模型。该模型随着研究的深入进一步发展和完善，目前造模动物多选用SD或Wistar大鼠、DBA/l或C57BL/6 　　小鼠。 　　CIA模型是一种免疫炎症模型，主要表现为多发性末端关节炎。通过抗原刺激引起自身免疫反应诱导关节炎产生，并形成抗CⅡ抗体，且可持续发展，并且更加符合人类疾病特点，包括关节红肿、滑膜增生、炎性细胞浸润、血管翳形成、关节软骨和骨破坏等，与RA临床表现更相似，是研究以及筛选治疗RA药物的理想模型。 　　2.1 造模方法 以DBA/1小鼠为例，首先将CⅡ（Ⅱ型胶原）溶于0.1 mol?L-1的醋酸中，浓度为2 g?L-1，在4 ℃环境中过夜后与等量CFA充分乳化，制得CⅡ乳剂（即每毫升含1 mg CⅡ和1 mg BCG），可于冰上配制，现配现用。免疫时，在小鼠尾根部、背部多点进行皮内注射0.1 mL，21 d后，对每只小鼠进行腹腔内注射CⅡ乳剂0.1 mL，达到加强免疫的目的。 　　CIA模型具有典型的多发性关节炎表现，Zhang等[11-12]研究发现，小鼠在致炎后24