慢性丙肝患者血清中HCV—RNA与HCV—Ab的相关性分析.docVIP

慢性丙肝患者血清中HCV—RNA与HCV—Ab的相关性分析 　　[摘要] 目的 探讨慢性丙型肝炎患者外周血中HCV RNA与HCV-Ab联合检测在丙型肝炎诊断的应用价值，为临床提供诊断治疗依据。方法 收集92例可疑慢性丙型肝炎患者血清，采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）进行丙型肝炎病毒检测及ELISA法检HCV-Ab。结果 HCV RNA阳性率为78.3%（72/92）；抗-HCV阳性率为73.9%（68/92）最后，利用SPSS软件做统计分析。结论 HCV RNA含量与抗-HCV含量呈正相关（r=0.892，P0.01），且有符合性和互补性。 　　[关键词] HCV RNA； 实时荧光定量PCR； 丙型肝炎病毒抗体 　　丙型肝炎病毒是单股正链RNA病毒，属黄病毒科丙型肝炎属。丙型肝炎呈世界性分布，丙型肝炎病毒（HCV）是丙型肝炎的病原体，主要由输血和注射等途径传染，其致病机制主要是通过病理性免疫应答导致肝细胞损伤，它还有诱发原发性肝癌的可能[1]。据世界卫生组织统计，全球丙型肝炎病毒（HCV）的感染率约为3%，每年新发HCV病例约315万例[2]，而高度慢性化是该病的最大特征[3]，其中10%-15%发展为肝纤维化，最终每年有1%-4%成为肝癌。由于当前医学界并没有有效的抗病毒药物与HCV疫苗，必须高度重视对于可能患有该类疾病的人群的早发现、早诊断和早治疗，从而有效地对丙型肝炎的发生与传播进行控制。 　　目前临床对丙型肝炎的诊断仍是以临床症状结合抗-HCV抗体、HCV RNA等实验室指标为临床诊断依据。HCV RNA是HCV的核心成分，Mercier等[4]发展了HCV RNA的实时荧光定量PCR（FQ-PCR）技术，敏感性高，HCV RNA荧光定量检测被认为是诊断HCV病毒血症的“金标准”[5-6]，可以反映HCV的复制状态以及传染性，继而分析受检者感染丙型肝炎病毒的状态。同时，丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）标志物—HCV抗原抗体系统作为对丙型肝炎病毒感染进行诊断和疗效观察的传统检测， 抗-HCV可维持10年，反映的是宿主免疫系统对病毒感染的反应及免疫状态。 　　以上两种检测是临床医生判断HCV感染状态的最常用的指标。本研究采用ELISA、FQ-PCR法分别对92例可疑分子慢性丙型肝炎患者血清中抗HCV、HCV RNA进行检测，并对检测结果进行统计学分析，探讨二者间存在的关系，更有利于临床对慢性丙型肝炎病毒感染的诊断，治疗方案的选择及疗效判定。 　　1 材料与方法 　　1.1材料 　　1.1.1 材料收集 采自2012年12月～2013年12月本院门诊及收治住院的慢性丙型肝炎患者92例，其中男性58例，女性34例，年龄在16-52岁，平均年龄（32±11）岁。诊断均符合2000年西安全国传染病与寄生虫病学术仁义修订的病毒性肝炎防治方案中拟订的诊断标准，患者没有失代偿的肝病或肝癌，未检测到HAV、HBV、HDV、HEV和HIV，且在3月内使用免疫抑制剂。并已排除酒精性、药物性、中毒性肝炎、脂肪肝、自身免疫性肝病、代谢性肝病。标本的采集与保存按照本实验室相应标准操作程序（SOP）进行。系空腹抽静脉血，分离血清后于- 20 ℃冰箱保存备用。 　　1.1.2 方法 　　1.1.2.1采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）定性检测丙型肝炎病毒抗体，样品OD值/CO值（S/SO值）≥1为HCV抗体反应阳性，检测仪器Phomo全自动酶免仪，检测试剂盒来自北京贝尔生物工程有限公司，生产批检测方法严格按照试剂说明书进行。 　　1.1.2.2采用荧光定量聚合酶链反应（FQ PCR）法来检测患者血清中HCV RNA的含量，检测仪器系美国ABI公司7500 Real Time PCR System检测仪，检测试剂盒来自凯杰生物工程（深圳）有限公司，生产批结果以IU/mL表示，结果判定：≥5.0×102IU/mL为阳性。本实验室为卫生部临床检验中心技术认可的临床基因扩增检验实验室。 　　1.2 数据统计与分析 采用SPSS 17.0软件进行相关分析。 　　2 结果 HCV RNA及抗-HCV（+检测结果见表1，从表1中可看出，92例HCV RNA含量高于5.0×102IU/mL血清的病例其抗HCV阳性率为88.9%（64/72），经相关性分析，HCV RNA含量高于5.0×102IU/mL血清的病例与抗HCV 阳性率呈正相关（r=0.892，P0.01）。 　　3 讨论 　　丙型肝炎病毒（HCV）是导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌的主要原因之一.尽早诊断和治疗可望终止或延缓病变发展，从而改善患者预后。目前对丙型肝炎筛查的实验室指标