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酮体的生成实验报告
篇一:实验五肝中酮体的生成
实验五肝中酮体的生成
一、课堂目标
1.说出酮体在体内生成的必要条件及过程
2.注意观察比较和记录实验结果,分析原因,得出明确的结论 3.深入理解为什么酮体的生成是肝特有的功能 二、原理
酮体是乙酰乙酸,β—羟丁酸和丙酮三种物质的总称。肝脏中含有合成酮体的酶 系,用丁酸作为底物与新鲜的肝匀浆混合后保温,即有酮体生成,酮体与含亚硝基铁 氰化钠的显色粉作用产生紫红色化合物。经同样处理的肌匀浆,因缺乏酮体生成的酶 则不产生酮体,无显色反应。通过本实验能证明酮体生成部位。 三、试剂
1.生理盐水
2.洛克溶液 氯化钠0.9克、氯化钾0.042克、氯化钙0.024克、碳酸氢钠0.02 克、葡萄糖0.1克,将以上物质混合溶于水中,溶解后加入蒸馏水至100毫升。 3.0.5摩尔/升丁酸溶液 取44.0克丁酸溶于0.1摩尔/升氢氧化钠溶液中,并用0.1摩尔/升氢氧化钠稀释至100毫升。
4.0.1摩尔/升磷酸缓冲液(pH7.6) 准确称取磷酸氢二钠7.74克和磷酸二氢 钠0.897克,用蒸馏水稀释至500毫升,精确测定pH值。 5.15%三氯醋酸溶液 6.显色粉 亚硝基铁氰化钠四、器材
试管及试管架、滴管,解剖剪刀、搅拌机、恒温水浴箱、台式天平、离心机、小药匙。五、操作
1,肝匀浆和肌匀浆的制备;取家兔一只,处死后迅速取出肝和大腿肌肉
各约10克,分别放入搅拌机磨成浆,然后各加入生理盐水20毫升混匀,过滤,备用。 2.取试管4支,标号,按下表操作
3.将各管摇匀后,置入37水浴中保温40~50分钟。
4.取出各管,各加入15%三氯醋酸10滴,混匀,离心5分钟(3000转/分)。
5.分别取出上述各管上清液,放入显色粉一小匙,观察和记录所产生的颜色反应,并分析结果。
六、实验报告
2.简答
(1) 何谓酮体? 酮体在何处生成? 何处利用? 为什么? (2) 酮体生成有何生理意义?
实验日期:____月 ____日评分____________评改老师___________
篇二:酮体的生成和利用
酮体的生成和利用
酮体是脂肪酸在肝内分解氧化时的正常中间代谢产物,它包括乙酰乙酸、β-羟丁酸及丙酮三种有机物质。其中β-羟丁酸含量较多,丙酮含量极微。
(1) 酮体的生成
以乙酰CoA为原料,在肝线粒体经酶催化先缩合,后再裂解而生成酮体,除肝之外,肾也含有生成酮体的酮体系。酮体的合成过程可分三步进行。
首先由两分子乙酰CoA在硫解酶的作用下缩合生成乙酰乙酰CoA,同时释放出一分子CoA-SH。【反应式1】 然后,乙酰乙酰CoA再与一分子乙酰CoA结合生成6个碳的3-羟甲基戊二酸单酰CoA(HMGCoA),并释放出CoA-SH,此反应是由HMGCoA合成酶催化的,该酶在肝线粒体含量极高。【反应式2
】
乙酰乙酸被还原生成β-羟丁酸,该还原反应是由紧密结合在线粒体内膜上的β-羟丁酸脱氢酶(此酶在肝中活性极高)催化,还原反应所需的氢由NADH提供。该
+反应速度取决于NADH/NAD 之比值。部分乙酰乙酸还可缓慢地自发脱羧,亦可经乙
酰乙酸脱羧酶催化脱羧生成丙酮。
【肝内酮体的生成】
肝含有合成酮体的酶体系,故能生成酮体,但肝缺乏利用酮体的酶,因此不能氧化酮体,肝产生的酮体需经血液运输到肝外组织进一步氧化分解。
(2) 酮体的利用
酮体被氧化的关键是乙酰乙酸被激活为乙酰乙酸辅酶A,激活的途径有两种:一是在肝外组织细胞的线粒体内,β-羟丁酸经β-羟丁酸脱氢酶作用,被氧化生成乙酰乙酸,乙酰乙酸与琥珀酰CoA在β-酮脂酰CoA转移酶(β-ketoacyl CoA transferase)(3-氧酰CoA转移酶),即琥珀酰CoA;乙酰乙酸辅酶A转移酶催化下,生成乙酰乙酰CoA,同时放出琥珀酸。另一途径是在有HSCoA和ATP存在时,由乙酰乙酸硫激酶催化,使乙酰乙酸形成乙酰乙酰辅酶A,后者再经硫解生成两分子乙酰CoA。乙酰CoA进入三羧酸循环被彻底氧化。【肝外组织对酮体的利用】
丙酮不能按上述方式氧化,它可随尿排出。丙酮易挥发,如血中浓度过高时,丙酮还可经肺直接呼出。
肝是生成酮体的器官,但缺乏氧化酮体的酶,故肝中酮体不能氧化;肝外组织缺乏HMG CoA裂解酶,不产生酮体,却可氧化利用酮体。
【酮体的性质】
(3) 酮症
正常情况下,血中酮体含量很少,每1OOml血中酮体含量低于3mg(0.3mmol/L)。但在饥饿、高脂低糖膳食及糖尿病时,脂肪动员加强,脂肪酸氧化增多,酮体生成过多,超过肝外组织利用酮体的能力,引起血中酮体升高,当高过肾回收能力时,则尿中出现酮体,即为酮症(ketosis)。因酮体中乙酰乙酸及β-羟丁酸都是相对
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