预运动训练对局灶缺血大鼠纹状体单胺类神经递质及其代谢产物变化的影响.docVIP

预运动训练对局灶缺血大鼠纹状体单胺类神经递质及其代谢产物变化的影响 　　摘 要：以纹状体为目标核团，探讨预运动训练改善脑缺血损伤的机制。将雄性Wistar大鼠随机分为安静对照微透析组（CM）、安静对照染色组（CS）、预运动训练微透析组（EM）及预运动训练染色组（ES）（每组10只）。首先在CM及EM组大鼠纹状体内埋植微透析探针导轨，手术恢复后，对EM及ES组大鼠进行为期4周的有氧运动训练。训练结束后，对所有大鼠实施大脑中动脉阻塞手术，并运用微透析-高效液相色谱电化学联用技术对缺血及再灌注过程中大鼠纹状体细胞外液多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）及各自代谢产物二羟苯乙酸（DOPAC）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）、3-甲基4-羟基苯乙二醇（MHPG）的变化进行观察。CS及ES组大鼠，在大脑中动脉阻塞手术恢复24 h，取脑进行TTC染色。染色结果发现，与CS组相比，ES组大鼠纹状体损伤面积比例显著降低（P0.05）。微透析研究结果发现，缺血过程中CM及EM组大鼠纹状胞体外DA水平均呈快速上升趋势，且EM组上升幅度低于CM组（P0.05），随后两组DA水平均逐渐下降，再灌注过程中基本稳定于基线以下水平。DA代谢产物DOPAC变化趋势为，缺血过程中两组大鼠纹状体胞外DOPAC均快速下降，但EM组下降幅度小于CM组（P0.05），随后两组DOPAC水平逐渐上升，再灌注过程中DOPAC水平呈先快速上升后逐步下降趋势。缺血及再灌注过程中5-HT、NE及其各自代谢产物水平变化与DA、DOPAC变化趋势基本一致。以上结果表明，科学、合理的预运动训练是保护缺血性脑损伤的一种有效手段，纹状体作为预运动训练发挥其神经保护作用的靶标核团之一，缺血及再灌注过程中，其胞外单胺类神经递质及其代谢产物水平的改变可能是预运动训练实现保护功能的途径之一。 　　关 键 词：运动生物化学；预运动训练；脑缺血；纹状体；单胺类神经递质；代谢产物；大鼠 　　中图分类号：G804.7 文献标志码：A 文章编号：1006-7116（2013）06-0132-06 　　脑卒中的发病率、死亡率、致残率居高不下，给家庭及社会带来沉重的经济负担[1-2]。前期大量实验已经证实，预运动训练（Exercise preconditioning）能够对随后发生的脑缺血损伤具有一定的保护作用[3-4]，该现象已经引起了越来越广泛的注意。 　　尽管预运动训练对脑缺血的保护作用已经得到了广泛证实，然而对其机制仍然知之甚少。脑卒中后，运动功能受损是其主要后遗症之一，探讨预运动训练对脑缺血过程中运动相关核团微环境、结构及功能的影响对于理解预运动训练的保护机制具有重要意义。纹状体（Striatum）是基底神经节最主要的核团之一，其神经元不仅参与随意运动的程序编制与执行，在调节运动方向、顺序、速度和幅度等方面发挥作用，而且在运动可塑性如习惯形成和条件行为等方面也起着特殊作用[5]。贾杰等[6]研究发现，预运动训练可抑制随后发生的脑缺血过程中纹状体内谷氨酸（Glutamate，Glu）及天门冬氨酸（Aspartic acid，Asp）的过度释放，且使mGluR1 mRNA表达下调，两者共同作用对缺血过程中的兴奋性毒性起到一定程度的抑制作用。已知在纹状体内除Glu及Asp等氨基酸类神经递质外，单胺类神经递质（如多巴胺（Dopamine，DA）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）及去甲肾上腺素（Norepinephrine，NE）等）也是一类非常重要的神经递质，文献资料已经证实，DA及5-HT等多种单胺类神经递质的变化与纹状体缺血损伤的发生密切相关[7]。预运动训练是否通过调控缺血过程中纹状体单胺类神经递质浓度变化进而起到保护纹状体神经元的作用，目前尚未见到相关报道。为此，本研究采用微透析及高效液相色谱-电化学联用技术对预运动训练大鼠缺血过程中纹状体DA、5-HT、NE及其代谢产物的变化进行观察，探讨预运动训练对纹状体的神经保护作用机制，为进一步揭示预运动训练改善脑缺血损伤的机制提供理论依据和数据支撑。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验对象与分组 　　实验采用雄性Wistar大鼠（北京大学实验动物中心），体重（290±20） g，常规分笼饲养，自由进食饮水，自然光照，动物房内温度20～23 ℃，相对湿度为40%～60%。适应性饲养2 d后，对大鼠进行适应性跑台运动，每天1次，速度10 m/min，15 min，连续3 d。第4天对大鼠运动能力进行检测，能够以10 m/min速度持续运动30 min的大鼠将被用于后续实验，否则将被剔除。筛选后的大鼠随机分为安静对照微透析组（CM）、安静对照染色组（CS）、预运动训练微透析组（EM）及