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- 2016-12-29 发布于广东
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背 景 层析法也称色谱法,是1906年俄国植物学家Michael Tswett发现并命名的。他将植物叶子的色素通过装填有吸附剂的柱子,各种色素以不同的速率流动后形成不同的色带而被分开,由此得名为“色谱法”(Chromatography) 。 后来无色物质也可利用吸附柱层析分离。 英国生物学家Martin和Synge。他们首先提出了色谱塔板理论。 1944年出现纸层析以后,层析法不断发展,相继出现薄层层析、亲和层析、凝胶层析、气相层析、高压液相层析等。 层析的两种相 固定相:固定相是层析的一个基质。它可以是固体物质(如吸附剂,凝胶,离子交换剂等),也可以是液体物质(如固定在硅胶或纤维素上的溶液),这些基质能与待分离的化合物进行可逆的吸附,溶解,交换等作用。 流动相:在层析过程中,推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或超临界体等,都称为流动相。在柱层析中一般称为洗脱剂,薄层层析时称为展层剂。 层析法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异(如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等),使各组分在两相(一相为固定的,称为固定相;另一相流过固定相,称为流动相)中的分布程度不同,即各组分所受的固定相的阻力和流动相的推力影响不同,从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的。 亲和层析法 亲和层析(Affinity Chromatography)是利用生物分子间专一性亲和力
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