高二生物选修1 血红蛋白的提取和分离
一、课题目标:
1、通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法。
2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。
二、过程:
(一)基础知识
1、凝胶色谱法
①凝胶色谱法的原理?
②凝胶色谱法有哪些用途?
③凝胶色谱法分离过程?
2、缓冲液
①缓冲液的组成、作用?
②试说说人体血浆中的PH能够保持稳定与什么物质有关?
3、电泳
①蛋白质分子在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度与所带净电荷的多少以及分子大小的关系?如何消除电荷对蛋白质迁移速度的影响?
②凝胶电泳法的原理?
(二)实验操作
1、蛋白质的提取和分离一般分为哪四步?
2、洗涤红细胞的目的是什么?
3、分离红细胞采用什么方法?
4、血红蛋白和血浆蛋白哪种蛋白存在于内环境中?血红蛋白的作用?
5、血红蛋白的释放的原理?
6、如何除去血红蛋白溶液中无机盐和小分子有机物质?该方法的采用的原理是什么?
7、根据凝胶色谱柱的装填步骤,试完成下表
步骤 操作要求 ① 操作要求
② 计算称量凝胶
③ 配制悬浮液
④ 装填悬浮液
⑤ 缓冲液洗涤平衡
例题分析:
1、某同学在实验课前从学校的附近的屠宰场取新鲜的猪血,并在采血容器中预先加入抗凝血剂檬酸钠
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