1.2 基因工程的基本操作程序.docVIP

1．2　基因工程的基本操作程序 2、掌握并理解基因工程的基本操作程序 3、尝试设计某一转基因生物的研制过程。 学习重点:基因工程的原理及基本操作程序 学习难点:1、从基因文库中获取目的基因。利用PCR技术扩增目的基因 ①从基因文库中获取目的基因　②利用PCR技术扩增目的基因　③反转录法　④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成 A．①②③④ B．①②③ C．①②④ D．②③ 三、基因表达载体的构建 1．基因表达载体的构建 (1)基因表达载体的组成 ①启动子 位置：基因的首端。 功能：是 ___________识别和结合的部位，驱动基因转录出 ________。 ②终止子 位置：基因的尾端。 功能：使 ___________-在所需要的地方停止下来。 ③标记基因：鉴别受体细胞中是否含有___________________ 。 (2)基因表达载体的功能 使目的基因在受体细胞中_____________，并且可以遗传给下一代，使目的基因能够______________和发挥作用。 (3)基因表达载体的构建 一般用_____________分别切割载体和目的基因，再用__________-把两者连接。 特别提醒　基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。 四．将目的基因导入受体细胞 (1)转化的概念 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内_______________的过程。 (2)将目的基因导入植物细胞 ① ___________________法：将目的基因导入双子叶植物和祼子植物。 ②____________________法：将目的基因导入单子叶植物常用的方法。 ③____________________法：我国科学家独创的一种方法。 (3)将目的基因导入动物细胞 方法：__________________________________法。 常用受体细胞：____________________________。 (4)将目的基因导入微生物细胞 第一步：首先用Ca2＋处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为____________________________-细胞。 第二步：将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收___________________________，完成转化过程。 特别提醒　 (1)对于植物来说，受体细胞可以是受精卵和体细胞，但常用体细胞。 (2)对于动物来说，受体细胞一般是受精卵。受精卵作为受体细胞具有体积大、易操作、经培养可直接表达性状的优点。而动物体细胞的全能性受限。 【预习巩固】 请据图回答下列问题。 (1)基因工程的核心步骤是_________________________。 (2)利用________技术可以获得大量的目的基因。该技术利用________的原理，将基因的核苷酸序列不断加以复制，使其数量呈指数增长。 (3)图中________位于目的基因的首端，是________识别和结合的部位。抗生素抗性基因的作用是作为________，用 于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因。 五、目的基因的检测与鉴定 1．分子检测 (1)检测转基因生物的染色体上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。 ①方法：_____________________ 技术(DNA探针＋转基因生物_______ )。 ②结果：如果显示出杂交带，就表明目的基因 。 (2)检测目的基因是否转录 ①方法：_______________技术(DNA探针＋转基因生物 ________ )。 ②结果：如果显示出杂交带，则表明目的基因________________ 。 (3)检测目的基因是否翻译成蛋白质 ①方法：____________________________ 。 ②结果：若有杂交带出现，则表明目的基因 ________________ 2．个体水平鉴定 包括抗虫、抗病的___________实验，以确定是否有抗性及抗性程度。基因工程产品需要与天然产品活性进行比较等。 【预习巩固】目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是(　　)。 ①检测受体细胞是否有目的基因　②检测受体细胞是否有致病基因　③检测目的基因是否转录mRNA　④检测目的基因是否翻译蛋白质 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ 学习篇： 一．目的基因的获取 1、[思维激活1] PCR过程中，需要解旋酶吗？所