大肠杆菌O157_H7量子点免疫层析试纸条的研制_袁列江pdf.doc

第３１卷第４期 ， Ｖｏｌ．３１Ｎｏ．４ ２ ０ １ ５年７月 Ｊｕｌ ．２ ０ １ ５ ： ／ ＤＯＩ１０．１３６５２ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－５７８８．２０１５．０４．０１０ 大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７量子点免疫层析试纸条的研制 Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔ ｉｍｍｕｎｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｔｅｓｔ ｓｔｒｉｐ ｆｏｒ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：Ｈ７ 袁列江１ 李萌立２ 王书源２ 杨梦昕２ 李忠海２ 　 　 　 　 ＹＵＡＮ Ｌｉｅ－ｊｉａｎｇ１ ＬＩ Ｍｅｎｇ－ｌｉ２ ＷＡＮＧ Ｓｈｕ－ｙｕａｎ２ ＹＡＮＧ Ｍｅｎｇ－ｘｉｎ２ ＬＩ Ｚｈｏｎｇ－ｈａｉ２ （１．湖南产商品质量监督检验检疫局，湖南 长沙 ４１０００７； ２．中南林业科技大学食品科学与工程学院，湖南 长沙 ４１０００４） （１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｒｏｄｕｃｔ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ４１０００７，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｅｎｔｒａｌ Ｓｏｕｔｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ４１０００４，Ｃｈｉｎａ）  摘要：研制一种大肠杆菌 Ｏ１５７：Ｈ７量子点免疫层析试纸。 利用自制水溶性量子点静电偶联大肠杆菌 Ｏ１５７：Ｈ７单克隆 抗体，将大肠杆菌 Ｏ１５７：Ｈ７单克隆抗体和羊抗兔二抗划线 于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线，制备双抗体夹心 法检测大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７的量子点免疫层析试纸。该试纸 条能在５ｍｉｎ内完成检测，检测限制为１×１０４ ＣＦＵ／ｍＬ，对 常见的８种食源菌无交叉反应。基于量子点的大肠杆菌 Ｏ１５７：Ｈ７免疫层析试纸操作简便，灵敏度和特异性较好，可 用于食品快速检测。 关键词：大肠杆菌 Ｏ１５７：Ｈ７；量子点；免疫层析 Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔｓｂ（ＱＤｓ）ｉｍｍｕｎｅ ｃｈｒｏｍａｔｏ－ ｇｒａｐｈｉｃ ｓｔｒｉｐ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｒａｐｉｄ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：Ｈ７．Ｗａｔｅｒ ｓｏｌｕｂｌｅ ＱＤｓ ｗａｓ ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ ｃｏｕｐｌｅｄ ｗｉｔｈ ｍｏｕｓｅ ａｎｔｉ－Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：Ｈ７ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｎｄ ｍｏｕｓｅ ａｎｔｉ－ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：Ｈ７ａｎｄ ｒａｂｂｉｔ ａｎｔｉ－ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ ｗｅｒｅ ｍａｒｋｉｎｇ ｏｎ ｔｈｅ ＮＣ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｓ ｔｅｓｔ ｌｉｎｅ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｌｉｎｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｔｒｉｐ ｔｅｓｔ ｐａｐｅｒ ｗａｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｄｏｕｂｌｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓａｎｄｗｉｃｈ．Ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｔｒｉｐ ｔｅｓｔ，ｏｎｌｙ ５ｍｉｎ ｗａｓ ｎｅｅｄｅｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｄｅｔｅｃ－ ｔｉｏｎ ｗａｓ １×１０４ ＣＦＵ／ｍＬ．Ｎｏ ｃｒｏｓｓ－ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｗｉｔｈ ８ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｃｏｍｍｏｎ ｆｏｏｄ ｂｏｒｎｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ．Ｔｈｅ ＱＤｓ ｉｍｍｕｎｅ ｃｈｒｏｍａｔｏ－ ｇｒａｐｈｉｃ ｓｔｒｉｐ ｔｅｓｔ ｏｆｆｅｒｓ ａ ｒａｐｉｄ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｔｏｏｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：Ｈ７ 基金项目：国 家 科 技 支 撑 计 划 课 题 （编 号：２０１２ＢＡＤ２９Ｂ０５， ２０１２ＢＡＣ０１Ｂ０７）；质 检 公 益 性 行 业 科 研 专 项 （编 号： ２０１３１００１２８，２０１２１００３５） 作者简介：袁列江（１９７３－），男，湖南产商品质量监督检验检疫局研 究员，博士。Ｅｍａｉｌ：ｕａｎｌｉｅｉａｎ １６３．ｃｏｍ － ｙ ｊ ｇ＠ 通讯作者：李忠海 收稿日期：２０１５－０６－１２  Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ