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- 2017-01-02 发布于浙江
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细菌遗传分析 大肠杆菌 F+×F-的特点: (1)F质粒转移的频率高,1/10。 (2)而染色体转移频率低。10-7,使F-→F+ F+品系又称为低频重组品系 高频重组品系Hfr(high frequency recombination) Cavalli(1951)和Hayes(1954)先后从能育的F+品系中分离出两个新的品系,它们和F-杂交,出现重组频率很高。比F+×F-高出1000倍。这种品系称为高频重组品系Hfr。 Hfr 的特点 : (1)高频重组,染色体转移频率高, ×1000 (2)F质粒转移频率低 F-变成F+很少或没有。 细菌重组的特点 四、中断杂交实验与重组作图(一)中断杂交试验 基因从Hfr细胞按次序转入F-细胞,可根据基因进入F-细胞的时间和次序作成基因图谱。 中断杂交试验 Hfr菌株的基因型:strs azirtonrgal+ lac+leu+thr+ F- 菌株的基因型:strrazistonsgal- lac-leu-thr- 基因 转入时间( min) 频率 thr+ 8 100 leu+ 8.5 100 azs 9 90 Tis 11 70 lac+ 18 40 gal+ 25 25 二、转化(transformation) 1. 转化:细菌直接从环境中吸收DNA而使自身遗传性状发生改变的现象。在细菌群体中,并非所有细胞均可被转化,能被转化的细胞只占总数的极少数。 2. 感受态:能吸收DNA分子而被转化的生理状态。不同的微生物出现感受态的时间和感受态持续的时间是不一样的。 4. 转化过程 (1) 感受态的出现 (2) 转化因子的吸附和吸收 细胞出现感受后,双链DNA吸附在细胞表面的特异性受体上,然后在DNA内切酶和外切酶的作用下,将其中的一条单链降解,另一条单链与感受态特异蛋白接合而进入细胞内。 (3)转化因子的整合 进入细胞中的DNA以单链形式与受体细胞的DNA进行重组。重组的片段平均长度为8.5kb。被替代的片段随之降解。 5. 转化效率 1. 受体细胞的感受态:它决定转化因子能否进入细胞。 2. 受体DNA和转化因子的同源性:它决定了转化因子能否整合。 重组百分率的标准公式如下: (第二次减数分裂分离子囊数)×1/2×100% 子囊总数 一、噬菌体的结构和形态 病毒无细胞结构,仅由蛋白质和核酸构成,可以分为: (1). 动物病毒 (2). 植物病毒 (3). 细菌病毒(噬菌体, bacteriophage, phage) T噬菌体的结构 蛋白质外壳 核酸 二、噬菌体的繁殖和感染周期 (1). 烈性噬菌体: 如T噬菌体 吸附 细菌裂解,释放出子代噬菌体颗粒 细菌染色体降解 噬菌体DNA和蛋白质外壳包装成 子代噬菌体颗粒 (2). 温和噬菌体: 吸附 溶菌周期 - uv诱导 细菌裂解 溶源周期 如?噬菌体: 原噬菌体 三、 噬菌体的突变型 1). 条件致死突变型: (1). 温度敏感突变 (2). 抑制因子敏感突变 2).宿主范围突变型: E.coli B E.coli B/2 E.coli B+E.coli B/2 h+ + - 半透明噬菌斑 h- + + 透明噬菌斑 3).噬菌斑形态突变型: (1). r+ 小噬菌斑,边缘模糊 (2). r- 大噬菌斑,边缘清晰: 快速溶菌(rapid lysis) 噬菌体的基因重组 基因重组 用T2噬菌体h-r+和h+r-混合感染E.coli B,再
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