液相色谱仪的硬件与软件操作液相色谱仪的硬件与软件操作.docxVIP

化学与环境学院近代有机分析实验报告实验名称液相色谱仪的硬件与软件操作 学生姓名学 号 专 业 年级、班级 指导老师 日 期实验报告书写要求1．实验报告应妥善保存，避免水浸、墨污、卷边，保持整洁、完好、无破损、不丢失。不得缺页或挖补；如有缺、漏页，详细说明原因。2．实验报告应用字规范，字迹工整，须用蓝色或黑色字迹的钢笔或签字笔书写，不得使用铅笔或其它易褪色的书写工具书写（实验装置图除外）。3．实验现象必须做到及时、真实、准确、完整记录，防止漏记和随意捏造。实验结果必须如实记录，严禁伪造数据。4．实验前必须做好实验预习。【实验目的】1.了解高效液相色谱仪的基本结构及仪器掌握分离分析的基本原理；2.学习掌握液相色谱仪的硬件操作及软件操作。【实验原理】高效液相色谱仪为岛津液相色谱仪由SPD-20A检测器、LC-20AT泵（A、B泵）、微量进样器（50μL）、Atlantis C18色谱柱、CBM系统控制器等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程。各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到CBM系统控制器，数据以图谱形式打印出来。【主要试剂及物理性质】名称分子量熔点/℃沸点/℃外观甲醇32.04-97℃64.7℃无色液体甲苯92.14-95℃110.6℃无色澄清液体【仪器试剂】仪器：岛津液相色谱仪LC-20AT，SPD-20A检测器，LC-20AT泵，微量进样器（50 μL），Atlantis C18色谱柱试剂：甲苯标准液（1000 ppm）、甲醇（AR），超纯水【实验步骤】反应时间实验步骤实验现象1、准备：每次进样之前都应该用甲醇洗针15—20次；用合适的0.45μm滤膜过滤流动相，超声脱气20min（这里用的是流动相是甲醇（AR）(B)和超纯水(A)，分别用有机相系和水相系的0.45 μm滤膜过滤）；配制样品浓度为1000 ppm（也可在平衡系统时配制）；根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱和定量环；检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。2、开机：接通电源，依次开启不间断电源、B泵、A泵、检测器。待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站（即电脑桌面上的CS-Light Real Time Analysis）。参数设定：在检测器显示初始屏幕时，按[func]键接着按[Enter]键，用数字键输入所需波长值254 nm，按[Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。流速设定：在A泵显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需的流速（柱在线流速一般不超过1ml/min，流速设置过大，柱压加大，影响柱效）按[Enter]键确认。按[CE]键退出。流动相比例设定：在A泵显示初始屏幕时，按[conc]键，用数字键输入流动相B的浓度百分数。本次实验设置流动相比例：水（A）20%、甲醇（B）80%。按[Enter]键确认。按[CE]键退出。3、更换流动相并排气泡将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中，两个泵上部中间的黑色旋钮(排液阀)逆时针旋转90~180度，分别按A、B泵的[purge]键对泵进行冲泵，脱去流动相中的气泡。屏幕显示为“Purgeing line”,当冲泵完成后则恢复初始屏幕，各泵各冲2次；将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。4、平衡系统按A泵的[pump]键，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。检查各管路连接处是否漏液（可用滤纸擦拭检查），如漏液(压力值迅速下降)应予以排除。观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，则从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[pump]键，冲洗3min后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。观察基线变化。如果冲洗至基线漂移0.01mV/min，噪声为0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。5、在桌面上找到CS-Light Real Time Analysis，双击图标。输入用户名Admin，点击确定。进样前在CS-Light Real Time Analysis中:点击“单次分析”，接着点击“样品记录”，在样品记录名称中输入所要检测得样品名称，然后点击“数据文件”选择该样品储存在哪里，最后在“数据储存的文件夹”后面输入该样品名称，点击确定。在信号采集菜单中设定停止时间（8 mi