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湿疣的规范诊疗.
湿疣的治疗
湿疣是由人类乳头瘤病毒(HPV)感染引起的一种性传播疾病。主要类型为HPV1、2、6、11、16、18、31、33及35型等, HPV16和18型长期感染可能与女性宫颈癌的发生有关。已知的人类乳突病毒有一百多种基因型,其中有三十余种会感染人类生殖器官的皮肤及黏膜,造成各种疾病。尖锐湿疣不及时治疗的话对男性朋友的健康会产生一系列的危害。很多人因对尖锐湿疣的症状不了解而延误了疾病的最佳治疗时期。
症状
男性患者好发于包皮系带、冠状沟、包皮、尿道、阴茎、肛门周围和阴囊。病初为淡红或污红色粟状大小赘生物,性质柔软,顶端稍尖,逐渐长大或增多。可发展成乳头状或囊状,基底稍宽或有带,表面有颗粒。在肛门部常增大,状如菜花,表面湿润或有出血,在颗粒间常积存有脓液,散发恶臭气味,搔抓后可继发感染。位于湿度较低干燥部位的生殖器疣,损害常小而呈扁平疣状。位于湿热湿润部位的疣常表现为丝状或乳头瘤状,易融合成大的团块。有严重肝病的患者湿疣可增大。妊娠可使湿疣复发或生长加快。
湿疣的形状
湿疣性状
1、有的为针刺状疣体,较多见与女性肛周。
2、条索状疣体,较多见于男性包皮环切术后,沿包皮创面如麻绳捆满冠状沟一样,系带部位亦有。
3、有的疣体小而互不融合,呈散在或密集的点滴状。
4、大多疣体互相融合或联合成树脂状,宝塔状、栅栏装、海星状、半球状、蜗牛状、金龟状。
5、较大的疣体常形成鸡冠状。
6、菜花状者更为多,其中有小菜花状、中菜花状、大菜花状。
7、有些病人外阴由于潮湿,或分泌物过多而呈现水疱状疣体。
8、有些病人由于感染时间较长,局限于干燥角化增厚或结痂,而呈现蛎壳状疣体。
9、有些患者疣体在一个部位不断增大形成蕈样有蒂的疣体,有的类似干蛎枝壳样或草莓样。
10、也有不少病人感染HPV后疣体发展进行快,而且遍地开花。
诊疗规范
1、诊断标准:接触史,有非婚性接触史、配偶感染史或间接感染史。
2、实验室检查:皮损活检,有HPV感染的特征性凹空细胞的组织病理学变化特点。
必要时在皮损活检中用抗原或核酸检测显示有HPV。常见的是HPV6、11型,少见为HPV16、18型。
3 、病例分类:报告病例,具备1.1及1.2指标。确诊病例,具备1.1,1.2及1.3中的任何一项指标。
4、治疗原则:注意患者是否同时有淋球菌、衣原体、支原体、滴虫、霉菌等病原体感染,如有,应同时治疗。
患者配偶与性伴若有尖锐湿疣或其他性病,应同时治疗。治疗期间避免性生活。
(二)PCR扩增
1、 引物设计和合成:HPV基因组可分为早期区(E)和晚期区(L),每区含一系列开放读码框架(ORF)。序列分析表明,各型HPV的非编码区及E1、E6、E7和L1区均有保守序列。Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计合成引物MY11和MY09见表1,该引物与HPV 6、11、16、18及33型有互补序列,也可扩增其它型HPV。
2、PCR反应试剂:Taq DNA聚合酶(2U/ml)、10mmol/L dNTP贮备液(dATP、dCTP、dGTP、dTTP各10mmol/L),10×PCR缓冲液(500mmol KCl、40mmol/L MgCl2、100mmol/L Tris-HCl、pH 8.5),100μmol/L MY11和MY09贮备液,灭菌的玻璃蒸馏器制备的蒸馏水。
3、PCR扩增方法和程序:以100μl PCR反应液,用无菌0.5ml硅化塑料离心管为反应管进行扩增反应。
(1)实验前配制预混反应试剂并分装。预混反应试剂包括除标本DNA外的其它各种PCR反应试剂。
(2)各反应管依次加入10μl标本和90μl预混反应试剂。
(3)加入80-100μl石蜡油,在台式离心机上快速离心数秒钟,使各反应试剂收集于油层下。目前,PCR试剂已商品化,反应体积为25μl。使用时只加入标本DNA即可。
4、每次试验应设阳性及阴性对照。以载有HPV的重组质粒(每反应为100pg)或含有HPV的细胞系(如Caski、HeLa)DNA为阳性对照,以无HPV的人细胞系DNA为阴性对照。
(三)扩增产物的检测和分析
1、凝胶电泳:扩增反应结束后,取出反应管,冷却至室温,取10μl扩增产物用5%-7%聚丙烯酰胺凝胶或1.5%琼脂糖电泳,溴化乙锭染色,紫外分析仪下分析结果,分子量约为450bp处出现明显的DNA带。
2、核酸杂交:如果凝胶电泳无清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时,可用标记的公用混合探针和(或)型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。
鉴于PCR技术的高度敏感性,以生殖道脱落细胞为检材足以满足试验要求,避免了活检取材、研磨组织繁杂操作。一般情况下,PCR扩增产物经凝胶电泳,观察产生的DNA可直接作出诊断。因此,PCR技术检测HPV实验周期短、简便快速。
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