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发明专利撰写实例(生物技术)
说 明 书
去除甘蔗宿根矮化病的方法
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体而言,涉及一种去除甘蔗宿根矮化病的方法。
背景技术
甘蔗宿根矮化病是一种由细菌引起的病害,繁殖、生产和推广脱毒种苗是防止种苗带病传播,是提高甘蔗产量和糖分的一项重要举措,去除甘蔗宿根矮化病原物方法已在澳大利亚、美国、巴西、古巴、南非、菲律宾及中国台湾省等地应用多年。
现有去除甘蔗宿根矮化病生产甘蔗健康种苗多采用温水浸泡种茎或温水浸泡结合茎尖组培技术脱除甘蔗宿根矮化病的病原。
然而,温水浸泡的温度通常为50—52℃,该温度极为接近甘蔗芽的临界致死温度,另外老芽和嫩芽能承受的温度也不一样,温度过低脱毒效果差,温度过高,又容易导致甘蔗芽死亡。而茎尖脱毒培养技术需要取的茎尖大小为0.1—0.2mm,此法需要精密的仪器以及对操作人员的要求比较高,这与市场要求的低成本,高效率不相符合。
发明内容
本发明的目的是针对上述存在问题,提供一种去除甘蔗宿根矮化病的方法,达到优化甘蔗病原物脱除流程,提高效率的目的,为提供 抽检数量(袋) 60分钟阳性(袋) 90分钟阳性(袋) 120分钟阳性(袋) 50.0 50 32 25 21 50.5 50 13 5 0 51.0 50 6 3 0 51.5 50 5 2 0 52.0 50 0 0 0 ck 50 50 注:本试验甘蔗宿根矮化病的检测方法为斑点酶标免疫试验法(DB-EIA)检测RSD病菌
表2不同处理温度、不同处理时间对袋培腋芽苗成活率的影响
处理温度(℃) 处理数量(袋) 60分钟成活率(℅) 90分钟成活率(℅) 120分钟成活率(℅) 50.0 50 100.0 100.0 95.8 50.5 50 100.0 95.3 90.6 51.0 50 71.2 51.4 42.8 51.5 50 65.1 45.5 20.1 52.0 50 0 0 0 ck 50 100.0 100.0 100.0 注:成活率数据为每袋成活率的平均数。
实施例2:
该实施例中,步骤1和步骤3及后续育苗程序均同实施例1,所不同的是步骤2,现具体介绍如下:
2、腋芽培养
⑴浸种催芽
将已感染宿根矮化病的甘蔗植株剥掉蔗叶后在自来水下冲洗干净,切成单芽段,用浓度1‰的甲基多布菌溶液进行浸种消毒30min后置于温度38℃的人工气候箱中催芽7-10天。
⑵温室培养
切取上述催芽了7-10天的腋芽,在接种室中经过无菌操作步骤,逐层去除包裹的心叶,取出腋芽的顶端生长点组织1-2㎜进行离体培养,该培养基为固体培养基。培养30-45天即可诱导出丛生芽,将丛生芽转接至聚丙烯塑料袋中进行继代增殖培养。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何不经过创造性劳动想到的变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。
表3 不同处理温度、不同处理时间对去除甘蔗宿根矮化病的影响
处理温度(℃) 抽检数量(袋) 60分钟阳性(袋) 90分钟阳性(袋) 120分钟阳性(袋) 50.0 50 25 15 10 50.5 50 9 3 0 51.0 50 4 2 0 51.5 50 3 1 0 52.0 50 0 0 0 ck 50 50 注:本试验甘蔗宿根矮化病的检测方法为斑点酶标免疫试验法(DB-EIA)检测RSD病菌
表4 不同处理温度、不同处理时间对袋培腋芽苗成活率的影响
处理温度(℃) 处理数量(袋) 60分钟成活率(℅) 90分钟成活率(℅) 120分钟成活率(℅) 50.0 50 100.0 100.0 91.5 50.5 50 100.0 92.4 88.6 51.0 50 70.3 48.3 40.3 51.5 50 63.2 43.5 18.4 52.0 50 0 0 0 ck 50 100.0 100.0 100.0 注:成活率数据为每袋成活率的平均数。
权 利 要 求 书
1、去除甘蔗宿根矮化病的方法,包括如下步骤:甘蔗主栽品种或新品种生长正常植株,其中包括已感染宿根矮化病的甘蔗植株→取蔗稍腋芽或全茎腋芽→诱导腋芽苗丛生芽→腋芽苗丛生芽转接至塑料袋进行继代增殖→甘蔗腋芽苗温水脱毒处理→甘蔗宿根矮化病病原物检测→无病种苗增殖扩繁,进行常规后续生产流程→获得预期规格数量的健康种苗,其特征在于:直接用温水脱毒处理诱导出的甘蔗腋芽苗,所述的温水温度为50-52℃之间。
2、根据权利要求1所述的去除甘蔗宿根矮化病的方法,其特征在于:所述甘蔗腋芽苗温水脱毒处理,处理时间60min-120min。
3、根据权利要求2所述的去除甘蔗宿根矮化病的方法,其特征在于:所述水浴锅的温
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