卫生微生物实验全解.pptVIP

葡萄糖发酵 乳糖发酵 尿素酶试验 H2S试验 （微量发酵管） 穿刺接种法 靛基质试验（蛋白胨水液体培养基） 液体培养基 接种法 动力试验（半固体培养基） 穿刺接种法 半固体培养基的接种法 附： 液体培养基的接种法 附： 附： 上/乳糖/固体 下/葡萄糖/半固体 接种方法： 半固体穿刺接种（接种针） 斜面接种（接种环） 观察： 葡萄糖分解、乳糖分解、 H2S试验、动力实验 指示剂：酚红，酸性—黄色 碱红—红色 双糖铁培养基 葡萄糖+ 乳糖- H2S- 葡萄糖+ 乳糖- H2S+ 葡萄糖+ 乳糖+ H2S- 标准管 痢疾杆菌 伤寒杆菌 大肠杆菌 附： 血清学鉴定---（玻片凝集反应） 伤寒诊断血清 未知菌 + ？ 生理盐水 未知菌 + ？ 五类肠道杆菌的生化反应及动力 大肠杆菌 ⊕ ⊕ - - + + + /⊕ 变形杆菌 ⊕ - + + +/- + - /⊕ 乙型副伤 寒杆菌 ⊕ - ++ - - + -/⊕ 伤寒杆菌 + - +/- - - + -/+ 痢疾杆菌 + - - - +/- - -/+ 葡萄糖 乳糖 H2S 尿素 靛基质 动力 双糖铁 糖发酵试验结果观察和记录 反应现象 结果描述 变色、有气泡 产酸产气， 阳性，以“⊕”表示 变色、无气泡 产酸不产气， 阳性，以“+”表示 不变色、无气泡 阴性，以“-”表示 2. 靛基质试验 某些细菌含有色氨酸酶， 能分解蛋白胨中的色氨酸，生 成靛基质（吲哚）。吲哚与对 二甲氨基苯甲醛结合，可形成 红色化合物，即玫瑰吲哚，以 此鉴别细菌。　 3.硫化氢试验 某些细菌能分解含 硫的氨基酸(胱氨酸、半 胱氨酸等) 产生硫化氢， 硫化氢与培养基中的铁盐 反应，形成黑色的硫化铁 沉淀，为硫化氢试验阳性。 阴性 阳性 阳性 某些细菌能产生尿素 酶，将尿素分解产生氨， 氨使培养基变为碱性，使 培养基中的酚红指示剂呈 粉红色，培养基由黄色变 为红色，为阳性。 4.尿素分解试验 阴性 阳性 三、自然沉降法检测空气中溶血性链球菌（2人/组） 材料：血平板 方法： 对照 教室5 min 室外5 min 37 ℃ ×18-24h 结果：计数菌落数（cfu/皿），观察菌落数的差异 菌落计数方法 四、消毒效果实验室评价（2人/组) 材料：普通琼脂平板2块 大肠杆菌、金葡菌 消毒剂：来苏水、新洁尔灭、碘酒、紫药水 方法 药敏试验 --纸片法 新 碘 来 紫 新 碘 来 紫 大肠杆菌 金葡菌 37 ℃ ×18-24h 结果观察 抑菌圈直径≥15mm 高度敏感 抑菌圈直径10-15mm 中度敏感 抑菌圈直径≤10mm 低度敏感 无抑菌圈 不敏感或耐药 (直径mm) 来苏水 新洁尔灭 碘酒 紫药水 大肠杆菌 金葡菌 实验结束注意事项： 1 培养物做好标记。 2 培养物37 ℃ ×18-24h培养。 3 试管播于试管架培养、平皿倒置培养、微量发酵管扎牢放于平皿培养。 4 玻片丢于消毒缸，整理桌面。 5 消毒双手。 实验报告：4个报告 1 目的与原理 1.1 目的 1.2 原理 2 材料与方法 2.1 材料 2.2 方法 3 结果 4 讨论 5参考文献 实验安排 周五下午：1：00～ 一 细菌培养基制作（6人/组） 1 营养琼脂培养基 2 SS琼脂培养基 3 伊红美兰琼脂培养基 4 乳糖胆盐发酵管培养基 二 水的细菌总数测定（2人/组）