放射免疫学分析法放免疫学分析法.docVIP

放射免疫学分析法： 检测的是游离降钙素原、 结合型降 钙素原和降钙素基因相关肽前体的混合物， 而不能区分上述 3 种物质。 其检测灵敏度为 4 ng／ L ， 线性范围为 lO 77 ng／ L 。 该 法检测耗时长(19～ 22 h)， 而且有放射性元素的污染 ， 使用受 到限制。 1． 2 双抗夹心法： 使用 2 个单克隆体 ： 一个为单克隆抗降钙素 抗体 ， 另一个为单克隆抗降钙素抗体， 分别结合到降钙素原分 子的2 个部位， 这样可排除交叉反应。 其检测低限值为0． 1 g／ L。 该法操作简便 、 特异性强、 敏感性高， 2 h 可以出结果。 1． 3 胶体金比色法 ： 一种半定量检测降钙素原的方法， 是专门 制备好 的 PCT． Q 检测卡 ， 简便快捷 ， 整个检测过程不超过 30 m i n ， 结果分为 4 级： 正常(0． 5 ng／ m L ； 轻度升高0． 5 ng／ m L ； 明显升高2 ng／ m L ； 显著升高 10 ng／ m L。此法不依赖仪器、 操 作简便 、 快速， 适合床旁监测。 1． 4 透射免疫浊度法： 该测定方法简便 、 快速 ， 可自动化 ， 适 合于批量检测。虽然免疫透射比浊的方法学及临床应用尚需 做进一步的验证 ， 但其应用前景非常看好。 2 降钙素原的临床应 用 2． 1 降钙素原与感染性疾病 2． 1． 1 降钙素原与血行感染 、 菌血症 、 败血症 ： 研究发现降钙 素原是诊断血行感染、 菌血症、 败血症的一个较好指标陆 3 1 。在 感染发生后 3~6 h ， 即可检测到降钙素原水平升高。降钙素原 水平可以用来对败血症的预后进行预测，若降钙素原水平持 续升高或一直维持在比较高的水平， 常常提示预后不 良； 若降 钙素原水平快速降低至正常水平 ， 常提示预后良好。 还可用降 钙素原预测社区获得性肺炎和尿路感染后菌血症的发生t 41 。 降 钙素原0． 25 L 可排除菌血症的发生。 2． 1． 2 降钙素原与泌尿系感染 ： Peei le等阁 发现肾盂肾炎患儿 血清降钙素原与 c 反应蛋白相比敏感性相同， 但特异性前者 明显高于后者， 且与肾脏受累程度呈正相关 ， 并随治疗后的恢 复而下降，血清降钙素原水平可作为泌尿系感染患儿上下尿 路定位及疗效观察的指标。 2． 1． 3 降钙素原与腹腔内感染 ：降钙素原可作为排除肠阻塞 综合征造成的穿孔和局部缺血的一项非常好的指标1 6 1 ， 然而在 急性阑尾炎和胰腺炎时， 降钙素原的前瞻性作用非常有限1 7 1 。 2． 2 降钙素原与其他疾病 2． 2． 1 降钙素原与结缔组织病 ： 在结缔组织疾病的发病机制 中都涉及到细胞因子，它们在血浆中常常增高。当继发感染 时， 这些炎性检测标志不能全面反映患者的病情。 如炎性反应 仍持续或加重， 肿瘤坏死因子(TNF)一 0【 、 白细胞介素(IL)． 6 往 往因半衰期短而下降， 但降钙素原半衰期较长， 经较长时间后 降钙素原仍维持较高水平或继续增加。Shi n 等 寸19 例系统 性红斑狼疮(SLE )患者的研究发现， 合并细菌或真菌感染时 患者血清降钙素原水平明显高于病毒性感染、 SLE 活动期和 健康对照组，但 PCT 在病毒性感染、 SLE 活动期和健康对照 ·948 · 组间差异无统计学意义。 2． 2． 2 降钙素原与 2 型糖尿病 ： M ehment等 利用免疫化学发 光的方法。通过对 18 例 2 型糖尿病患者与健康无糖尿患者 的血清降钙素原水平进行研究 ， 经统计学分析 ， 证实二者差 异有统计学意义 (PO． 05)， 2 型糖尿病患者血清降钙素原水 平升高。患者血清降钙素原水平可用来解释 2 型糖尿病的临 床和生物学特点及其并发症。 3 问题与展望 降钙素原作为一种新的感染性炎性标志物目前已被广泛 认可 ， 具有快捷 、 有效的特点 ， 也具有早期敏感特异的特性 ， 优于传统的炎性标志物， 具有对病情的早期评估 、 预后 、 评价 的价值。但其确切的产生机制还不甚明了， 其病理 、 生理特点 还不完全清楚 ， 有待于进一步的研究。 参 考 文 献 4 P CT 实验 室检 测 方 法 4． 1 双抗夹心免疫化学发光法 双 抗夹心法 运用双 单克 隆抗 体 ， 抗钙素抗体作为捕 获抗体直接 结合 P CT 96 —106 氨 基酸 残 基即未成 熟 CT ： CC P 一1 部分 ， C T 抗体作为示踪 抗体直接结合 PCT T0 —76 氨基酸残基未成熟 c T 分子 ， 以人 工合成 的 P