Nacl胁迫对烟草种子发芽的影响.doc

NaCl胁迫对烟草种子萌发及幼苗生理特性的影响 摘要：研究不同浓度（质量分数）的NaCl (0、 0.3%、 0.6%、 0.9%、 1.2%、 1.5%)对烟草种子萌发及幼苗生理 特性的影响；测定了相对发芽势、相对发芽率、幼苗根长、以及叶绿素、细胞膜透性、丙二醛含量、脯氨酸 含量；随着盐浓度增加，烟草相对发芽势、相对发芽率、根的长度、叶绿素含量呈现下降的趋势；细胞膜透 性、脯氨酸含量则表现为持续升高趋势；丙二醛含量呈现先升后降的趋势；在盐浓度为1.2%时，烟草叶 片叶绿素含量降幅最大，而此时丙二醛含量达到最大值，这对研究烟草抗盐机制提供了可靠依据。 关键词：盐胁迫；烟草种子；种子萌发；生理特性 引言 盐胁迫是自然界中主要的非生物胁迫之一，目前 在全世界范围内，土壤盐碱化现象严重，全球大约有3.8亿hm2土地存在不同程度的盐渍化，而在中国盐碱 地分布广泛，据统计，有0.2亿hm2多的盐渍化土地[1]。水资源不足和土壤盐渍化严重阻碍了植物的正常生长，降低了农作物的产量，是影响生态环境和作物产量的重要因素。盐胁迫主要从两方面对植物造成伤害，分别是盐胁迫引起的生理干早和造成的离子毒害[2-3]。当植物受到盐胁迫时，通常会在体内合成渗透保护物质(osmoprotectant)如脯氨酸等和糖类及其衍生化合物等，以维持细胞正常渗透压和体内水分、保护细胞蛋白活性和膜结构等作用[4-5]。研究者已经报道了玉米[6]， 奇台红豆草[7]、黑麦草[8]、紫花苜蓿[9]等植物种子经过盐 胁迫处理后其萌发和幼苗生长期的生理响应。如包永霞等[8]发现，转DREB1A 基因的黑麦草T1代种子和非转基因对照种子，随着盐质量分数的不断增加，种子相对发芽势、相对发芽率不断下降，幼苗叶绿素含量也呈降低趋势，由于转基因组植株在盐胁迫下细胞膜透性变化不大，结构相对稳定，与对照相比有较强的抗盐性。韩德梁等[9]研究表明，‘中苜一号’紫花苜蓿种子发芽率随盐浓度增加而降低。0.6%的NaCl浓度可作为衡量‘中苜一号’种子耐盐性的标准，还发现低浓度 NaCl对紫花苜蓿幼苗生长有一定的促进作用，尤其对幼根的生长。朱志华等[10]研究表明，较高浓度的NaCl对烟草种子萌发有明显抑制现象，这是由于高盐会使植物细胞失水，使种子的正常代谢受到阻碍，进而影响烟草种子的萌发。等渗条件下的盐胁迫处理会使烟草的细胞膜透性和MDA含量增加，对不同的抗氧化酶代谢也有不同程度的影响，但是，外源甜菜碱和CaCl2 会增强烟草对盐胁迫的适应性[11-12]。烟草是中国重要的经济作物，但是土壤盐渍化严重制约了烟草的栽培范围。它本身是一种对盐较敏感的植物，其种子的萌发及幼苗的生长、生理特性都会随着盐胁迫发生变化。但是盐胁迫对烟草的影响机制仍然是一个无法解释清楚的复杂过程，耐盐机理也尚不清楚。本试验以烟草为研究材料，初步探讨了盐胁迫对烟草种子的萌发、生长情况及生理指标的影响，以期为揭示烟草对盐胁迫的耐受能力及适应机制提供参考依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 试验材料为珊西烟草种子( N i c o t i a n a t a b a c u m cv. X a n t h i - n c )，由北京林业大学林学院草坪研究所保存。 1.2 试验方法 试验精选饱满的烟草种子，烟草种子用2.5%次氯酸钠（有效氯）处理8 min，用无菌水清洗1次，然后用70%乙醇浸泡1 min，无菌水清洗4次，分别接种到含 有0(ck)、 0.3%、 0.6%、 0.9%、 1.2%、 1.5%盐浓度（质量分 数）的MS培养基上。每皿100粒种子，每组3次重复， 置于25℃，光照16 h/d，光强2000 lx条件下培养。 (1)相对发芽势和相对发芽率 于第7天统计相对发芽势=（第7天正常发芽种子数/供试种子数）×100%；于第10天统计相对发芽率=（第10天正常发芽种子数/供试种子数） ×100%[13]。 幼苗根长 第30天用直尺测定幼苗的绝对根长。 叶绿素含量测定30天采用分光光度法测定叶绿素含量[14]。 细胞膜透性测定 第 30 天 采 用 电 导 仪 (DDSJ-308)测定[15] 丙二醛(MDA)含量测定 MDA含量测定方法参 照[16]并进行优化。50 mg烟草叶片组织用1 mL 80%乙 醇冰上研磨， 4℃低温16000 g离心20 min，吸取上清液 0.5 mL 加入已准备好的 0.5 mL (20% TCA， 0.65% TBA)中，混合液置于95℃水浴锅中30 min，立即放在 冰上冷却， 4℃ 10000 g 离心 10 min，测量上清液在 450、532、600 nm处的吸光度值。 脯氨酸含量测定 第30天采取叶片100 mg，