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- 2017-01-10 发布于湖北
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HPLC流动相的选择解析
HPLC日常维护(三) ——流动相 * 一、 液相色谱流动相的性质、要求 理想的液相色谱流动相应具有: 低粘度 与检测器兼容性好 易于得到纯品 毒性低等特征。? 1. k’值是流动相组成的函数 溶剂强度增加 溶质在填料表面的吸附减少 相应的容量因子k’降低 2. 塔板数n一般与流动相的粘度成反比。 注意: 二、流动相选择原则 ? ①流动相应不改变填料的任何性质 低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料 有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改 变色谱柱填床的性质。 碱性流动相不能用于硅胶柱系统。 酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附 剂的柱系统。? ? ②纯度 色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。 ③必须与检测器匹配。 使用UV检测器时,所用流动相在检测波长下应没有吸收,或吸收很小。 使用示差折光检测器时,应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相,以提高灵敏度。? ④粘度要低(应2cp) 粘度太高时: 会影响溶质的扩散、传质,降低柱效; 还会使柱压降增加,使分离时间延长; 最好选择沸点在100℃以下的流动相。 三、液相色谱流动相的pH值 ?1.反相离子抑制技术: 采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱 碱(7≤pKa≤8)样品时,通过
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