基因修饰技术talencas9fzn试题.pptVIP

* 基因修饰技术 学生：邱 露 导师：张义国 目录 一：锌指蛋白核酸酶 二：转录激活因子样效应物核酸酶 三：CRISPR/Cas9系统 四：基因编辑原理 五：基因编辑系统构建 六：ZFN、TALEN、CAS9应用 一、ZFN 锌指蛋白核酸酶（Zinc finger nucleases，ZFN） ZFD1 ZFD3 ZFD2 ZFD4 Fok I Miller J在1983年在转录因子TFⅢA 中发现锌指蛋白结构。 Lee MS在1989年阐述了锌指蛋白识别三联体碱基。 Isalan M设计出与DNA高亲和结合特异锌指蛋白。 ZFD:Zinc finger domain 三联体碱基与锌指蛋白氨基酸序列对应表 三联体碱基与锌指蛋白氨基酸序列对应表 FokI：非特异性核酸内切酶 Finger1 Finger3 Finger2 Finger4 Fok I Sugisaki Hiroyuki 发现FokI核酸酶 （1981） FokI是来自海床黄杆菌的一种非特异性核酸内切酶，只在二聚体状态时才有酶切活性，每个FokI单体与一个锌指蛋白组相连构成一个ZFN，识别特定的位点，当两个识别位点相距恰当的距离时(6-8 bp)，两个单体FokI相互作用产生核酸内切酶活性，实现双链DNA 的定点剪切。 ZNF与DNA结合示意图 Fok I 二、TALEN 转录激活因子样效应物核酸酶（transc