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基因的定点突变 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 基因定点突变 一、定点突变的发展史 二、定点突变的目的 三、定点突变的原理 四、体外定点突变的方法 五、定点突变的方法改进 六、定位突变用途 七、应用前景 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、定点突变的发展史 1983年，世界上第一株转基因植株(zambryski，1983)的获得标志着植物转基因时代的到来。 1984年，Paszkowski将NP皿I等嵌合基因克隆到E.coh质粒上，并用PEG转化烟草获得成功。 1985年，Horsch等创立了农杆菌介导的叶盘法转基因系统，大大简化了以往利用原生质体为受体的转基因体系，具有里程碑的意义。 ?1987年，Frommetal转化CAT基因，获得成功。1987年，Jcffersontal利用GUS作为报告基因，使转基因愈伤组织和植株检测变为方便快速，大大的提高转基因效率。1987年，美国康耐尔大学的Sanford等发明了基因枪。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 1988年，ein首次将其用于植物转基因研究，克服了当时农杆菌介导的转基因方法的受体种类和基因型的限制，开创了植物转基因方法的新领域。McCabeetal利用基因枪法转化大豆幼胚和成熟胚的下胚轴获得了转基因再生植株。 1990年，From示etal利用基因枪法成功转化T玉米胚性愈伤组织。同年Fine:andMcmullen(1990)用陆地棉柯字310的胚性悬浮系进行的基因枪转化。获得了10个再生植株，较农杆菌介导的遗传转化，所用的再生时间较短(5个月)。其后，MeCabeandM inell报道T基因型独立的基因枪转化方法。 1994年，Hieital通过使用农杆菌侵染诱导剂乙酞丁香酮(AS)以及构建巧rG和巧rB高效表达的超双元载体，高效成功地转化了水稻。利用该转基因系统，Ishidaetal(1996)、Tingayetal(1997)和Chengetal(1997)相继获得了玉米、大麦和小麦的转基因植株。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、定点突变的目的 基因定点的突变是指按照设计的要求，使基因的特定序列发生插入、删除、置换和重排等变异。 体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间关系的有力工具。 蛋白质的结构决定其功能，对某个已知基因的特定碱基进行定点改变，缺失或者插入，可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构和功能，改造酶的不同活性或者动力学特性。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 三、定点突变的原理 定点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因组，也可以是质粒）中引入所需变化（通常是表征有利方向的变化），包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，是基因研究工作中一种非常有用的手段。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 四、体外定点突变的方法 （1）寡核苷酸介导的定点突变 （2）PCR介导的定点突变 （3）盒式突变 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. （1）寡核苷酸介导的定点突变 寡聚核苷酸定点诱变技术是