运动生理学实验复习运动生理学实验复习.doc

实验一 ABO血型鉴定 【实验目的】 通过本实验，了解人类血型的遗传特性及其遗传方式；掌握人体血型（ABO型）的检验方法。同时检测自己的血型。 【实验原理】 血型是指红细胞上特异抗原的类型。在ABO型系统中，红细胞上有两种凝集原，分别称为A、B凝集原，根据红细胞上的这两种凝集原的不同或有无，可将血液分为四个类型，即A型、B型、O型、AB型。在同一个体的血浆中，不会含有与他自身红细胞的抗原相对抗的抗体，相对抗的抗原与抗体相遇，会发生红细胞的凝集反应。因此，可以将A型血清和B型血清作为标准血清，观察在与受测试红细胞混合时是否出现凝集反应来判断受试者的血型。（如表一） ABO血型中的抗原和抗体 （表一） 血 型 红细胞膜上所含的抗原 血清中所含的抗体 O 无A和B 抗A和抗B A A 抗B B B 抗A AB A和B 无抗A和抗B 交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图1）。输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。 【实验器材】 显微镜、载玻片、刺血针、消毒牙签、抗A和抗B标准血清、生理盐水、酒精棉球。 【方法与步骤】 （一）ABO血型鉴定 1用玻片法鉴定血型（1）将已知的A型与B型标准血清各滴一滴在双凹玻片的凹内，分别标明A 与B。（2）用75%酒精棉球消毒指端后，采血针刺破皮肤，滴1—2滴血于盛有1毫升生理 盐 水的小试管内混匀，制成5%红细胞悬液。 （3）用滴管吸取红细胞悬液，分别滴一滴于玻片两端的血清上，再分别用牙签搅匀（注意严防两种血清接触）。（4）10—15分钟后用肉眼观察有无凝集现象。如无凝集现象，可再搅匀混合，再静置 10—15分钟，根据其有无凝集现象判断血型。 图 一 2试管法 （1）取试管2只，分别标明A、B字样，分别加入相应标准血清2滴，各管加入受试者的红细胞悬液1～2滴摇匀。 （2）将上述二试管用1000转/分离心1min。 （3）取出小试管，轻弹底部，如沉淀物呈团块状浮起为凝集，呈散在烟雾状上浮进而恢复原混悬状为无凝集。 （二） 交叉配血 （1）先用碘酒，继用75%酒精棉球消毒皮肤后，用消毒干燥注射器抽取受血者及供血者静脉血各2ml，各用一滴制备红细胞悬液，分别标明供血者与受血者。余下血分别注入干净小试管，也标明供血者与受血者，待其凝固后析出血清备用。 （2）左两凹玻片左侧标上“主”（即主侧）；右侧标上“次”（即次侧）。主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴；次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。 分别用竹签混匀。 （3） 15～30min后，观察结果。如两侧均无凝集现象，可多量输血；如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血；如主侧凝集则不能输血。 父母的血型与子女的血型关系 父母血型 子女可能有的血型 子女不可能有的血型 O+O O A、B、AB A+O A、O B、AB A+A A、O B、AB B+O B、O A、AB B+B B、O A、AB A+B A、B、AB、O --- AB+O A、B O、AB AB+B A、B、AB O AB+A A、B、AB O AB+AB A、B、AB O [注意事项]? （1）采血时，要用一定的力度，快速的刺破皮肤。以免用力小、动作缓慢，而只刺破表皮，无血液流出。（2）所用双凹玻片的试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象[思考题]1.用玻片法测定ABO血型，怎样判定其结果？2.如何区别血液的凝集与凝固，其机理是否一样？ 实验二 ?血红蛋白含量的测定 【实验目的】 掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。 【实验原理】 测定血红蛋白含量的方法很多，实验常用沙利氏比色法。其原理是在一定量的血液中，血红蛋白经少量盐酸的作用，使亚铁血红素变成高铁血红素，呈现较稳定的棕色。用水稀释后与标准色比较，求出每100ml血液中所含的血红蛋白克数。正常成年男子每100ml血液平均含14.4g，女子为13.1g。 【实验器材】 血红蛋白计、0.1mol/LHCl、刺血针、滤纸片、酒精棉球、乙醚、95%酒精、蒸馏水。 【实验方法与步骤】 1．血红蛋白计包括①标准比色架，架的两侧镶有两个棕色标准玻璃色柱