Agilent1200HPLCSOP(详)..docVIP

Agilent1200高效液相色谱仪操作规程开机1 将待测样品按要求前处理，准备HPLC 所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等。旋松Purge阀。 从“仪器”菜单中选择“设置泵”选项，进入泵编辑界面，也可由界面图标进入编辑参数。 设定流速：3-5ml/min，并设排气的溶剂比例为100%，单击确定。 单击桌面泵图标右下角控制开关，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，然后依次设置其他溶剂比例为100%，切换通道继续Purge，直到所有要用的通道无气泡为止。 将流速调整为1.0mL/min,单击桌面泵图标右下角控制开关，即关泵，关紧Purge 阀。 单击界面泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积或无溶剂时停泵，单击确定。数据采集方法编辑 1开始编辑完整方法：在主菜单“方法”项下“编辑完整方法”，选择方法信息、仪器采集、运行时选项表，单击确定，进入下一界面。 .2方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如方法的用途等），单击确定，进入下一界面。 .3设置泵：在“ 流速”处输入流速，“停止时间” 处输入停止采集的时间，“溶剂” 处输入各通道比例，“压力限” 处输入压力限制设定（一般为200bar），若需梯度洗脱，则在“时间表” 处输入时间、溶剂组成等梯度洗脱参数。单击确定，进入下一界面。 .4设置进样器：选择合适的进样方式，一般选洗针进样；“标准进样”只能输入进样体积，此方式无洗针功能；“洗针进样”可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针；“使用进样器程序”可以点击键进行进样程序编辑。单击确定，进入下一界面。 .5柱温箱参数设定：在“温度”下面的方框内输入所需温度，并选中它，点击“更多”键，选中“与左侧相同”----使柱温箱的温度左右一致。单击确定。 .6检测器参数设定.6.1 DAD检测器参数设定：在“信号”下方的空白处输入所需的检测波长和参比波长及其带宽，在“光谱“下选择存储方式，在“所需的灯”下选择灯类型，单击确定，进入下一界面。 6.2 ELSD检测器参数设定：如果需用DAD检测器则选择Silent Mode；如果需用ELSD检测器则不选Silent Mode，此时在界面设定温度、气体流量及增益值（一般为1）。 .7当出现“运行时选项表”单击确定。 8保存方法：从“方法” 项下选择“方法另存为”选择路径进行操作，输入文件名，单击确定。点击桌面上“启动”，即进行系统的平衡。编辑序列进行自动进样在主菜单“序列”项下选择“序列参数”，在窗口中“数据文件”下选择路径及子目录及数据采集的记录方式。 在主菜单“序列”项下选择“序列表”，在窗口中填写样品瓶、样品名称、方法名称、进样次数、样品量、进样量等信息，单击确定。 保存序列。 点击桌面上“开始”按钮即进行采集样品7数据分析方法编辑（打开仪器2脱机） 7.1从“序列模块”菜单中，单击“数据分析”进入数据分析界面。 7.2从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名，单击确定。 7.3积分 7.3.1从“积分”中选择“自动积分”，如积分结果不理想，再从菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的斜率、峰宽、最小峰面积、最小峰高及肩峰。 7.3.2从“积分”菜单中选择“积分”选项，则数据被积分。 7.3.3如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。 7.3.4单击左边“√”图标，将积分参数存入方法。 打印报告 .1从“报告”菜单中选择“设定报告”选项出现设定报告窗口，在报告格式中选“性能报告”。 .2从“报告”菜单中选择“打印报告”选项，则报告结果将打印在屏幕上，如要输出到打印机上，则单击报告底部的“打印”钮。 关机洗柱：先用水-甲醇（90：10）再用100%甲醇冲30分钟。 在使用ELSD后先撤去流动相，再用氮气吹扫检测池30分钟。 先退出化学工作站及其它窗口，再关闭计算机。 关掉Agilent 1200 LC各模块电源或ELSD检测器电源，并在《色谱仪器使用记录》上登记冲洗柱子记录。 注意事项定期检查排液阀的滤芯。检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5ml/min，若压力大于10bar,则须立即更换。 2 定期清洗溶剂过滤头（35％浓硝酸浸泡1小时，不要使用超声波清洗）3 流动相应经过0.45um或更小孔径的滤器过滤，如果使用滤膜，注意有机膜与 水膜的区别(聚四氟乙烯能适用于所有溶剂)4 样品进样之前最好过滤，如果样品量太少，可以用内插管。 5 在采集样品结束后应用流动相冲洗管路至少30分钟，再用甲醇－水系统冲洗管路。注意清洗在线脱气机及比例阀，尤其是长期使用水相或缓冲盐的通路，使用纯水冲洗后，再使用甲醇冲洗，可以打开Purge阀，使用5ml/min的流速。污染比较严重时，可