凝胶色谱实验报告..docxVIP

凝胶渗透色谱法测定聚合物的平均分子量及其分布一．实验背景简介聚合物分子量及其分子量分布聚合物性能的最主要参数之一，与聚合物力学性能有密切关系，对聚合物拉伸强度以及成型加工过程，如模塑，成模，纺丝等都有影响，研究聚合物的分子量及其分子量分布，对于控制改进产品质量具有重要意义。凝胶渗透色谱法利用分子溶液通过填充有某种凝胶的柱子，把聚合物分子按照尺寸大小进行分离的方法。目前是测定聚合物分子量及其分子量分布最有效的方法。它具有测定速度快、用量少、自动化程度高等优点，已获得广泛应用。 二．实验目的 1. 了解凝胶渗透色谱的原理； 2. 了解凝胶渗透色谱的仪器构造和凝胶渗透色谱的实验技术； 3. 测定聚苯乙烯样品的分子量分布。 三．实验原理 凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography，简称 GPC）也称为体积排除色谱 （Size Exclusion Chromatography，简称 SEC）是一种液体（液相）色谱。和各种类型的 色谱一样，GPC/SEC 的作用也是分离，其分离对象是同一聚合物种不同分子量的高分 子组份。当样品中不同分子量的各组份的分子量和含量被确定后，就可得到聚合物的分 子量分布，然后可以很方便地对分子量进行统计，得到各种平均值。 一般认为，GPC/SEC 是根据溶质体积的大小，在色谱中由于体积排除效应即渗透能力的差异进行分离。高分子在溶液中的体积决定于分子量、高分子链的柔顺性、支化、溶剂和温度，当高分子链的结构、溶剂和温度确定后，高分子的体积主要依赖于分子量。凝胶渗透色谱的固定相是多孔性微球，可由交联度很高的聚苯乙烯、聚丙烯酸酰胺、葡萄糖和琼脂糖的凝胶以及多孔硅胶、多孔玻璃等来制备。色谱的淋洗液是聚合物的溶剂。当聚合物溶液进入色谱后，溶质高分子向固定相的微孔中渗透。由于微孔尺寸与高分子的体积相当，高分子的渗透几率取决于高分子的体积，体积越小渗透几率越大，随着淋洗液流动，它在色谱中走过的路程就越长，用色谱术语就是淋洗体积或保留体积增大。反之，高分子体积增大，淋洗体积减小，因而达到依高分子体积进行分离的目的。基于这种分离机理，GPC/SEC 的淋洗体积是有极限的。当高分子体积增大到已完全不能向微孔渗透，淋洗体积趋于最小值，为固定相微球在色谱中的粒间体积。反之，当高分子体积减小到对微孔的渗透几率达到最大时，淋洗体积趋于最大值，为固定相微孔的总体积与粒间体积之和，因此只有高分子的体积居于两者之间，色谱才会有良好的分离作用。对一般色谱分辨率和分离效率的评定指标，在凝胶色谱中也沿用。 图 3-1 是 GPC/SEC 的构造示意图，淋洗液通过输液泵成为流速恒定的流动相，进入紧密装填多孔性微球的色谱柱，中间经过一个可将样品送往体系的进样装置。聚合物样品进样后，淋洗液带动溶液样品进入色谱柱并开始分离，随着淋洗液的不断洗提，被分离的高分子组份陆续从色谱柱中淋出。浓度检测器不断检测淋洗液中高分子组份的浓度响应，数据被记录最后得到一张完整的 GPC/SEC 淋洗曲线。如图 3-2。 图 3-1 GPC/SEC 的构造淋洗曲线表示 GPC/SEC 对聚合物样品依高分子体积进行分离的结果，并不是分子 量分布曲线。实验证明淋洗体积和聚合物分子量有如下关系： ln M = A ? BV或log M = A?B logV（3-1） 式中 M 为高分子组分的分子量，A、B（或 A’、B’）与高分子链结构、支化以及溶剂温度等影响高分子在溶液中的体积的因素有关，也与色谱的固定相、体积和操作条件等仪器因素有关，因此（1）式称为 GPC/SEC 的标定（校正）关系。（1）式的适用性还限制在色谱固定相渗透极限以内，也就是说分子量过高或太低都会使标定关系偏离线性。一般需要用一组已知分子量的窄分布的聚合物标准样品（标样）对仪器进行标定， 得到在指定实验条件，适用于结构和标样相同的聚合物的标定关系。 图 3-2 GPC/SEC 淋洗曲线和切割法示意图四．实验仪器和试剂 1．组合式 PL-GPC50，分析天平，微孔过滤器；配样瓶，注射针筒。 2．聚苯乙烯标样、聚苯乙烯、四氢呋喃（色谱纯，用0.45μm孔径的微孔过滤膜过滤） 五．实验步骤1. 样品配制 选取9个不同分子量的标样，按分子量顺序 1、3、5，2、6、8和4、7、9，每组标样分别称取约 2mg 混在一个配样瓶中，用针筒注入约6ml THF溶剂，溶解后 用装有 0.45 微米孔径的微孔滤膜的过滤器过滤。 在配样瓶中称取约 4mg 被测样品，注入约4ml 溶剂，溶解后过滤。 仪器观摩 了解 GPC/SEC 仪各组成部分的作用和大致结构，了解实验操作要点。设定淋洗液流 速为 1.0ml/min、柱温和检测温度为 30℃。了解数据处理系统的工作过程。 3. GPC/SEC 的标定