实验一普通光学显微镜的使用与生物绘图..docVIP

实验 普通光学显微镜的使用与生物绘图 【目的要求】 1. 了解显微镜的构造和各部分，掌握的使用技术和保养措施；学会装片。 绘生物图。实验内容与方法 1、显微镜的基本结构 显微镜构造很复杂，种类很多，但基本结构是由机械和光学两大部分构成，现分述如下： 1.1 机械部分它是为光学部分服务的部件，包括以下六部分： (1) 镜 座：显微镜最下面呈马蹄形或圆形的部分，起稳定和支持显微镜作用。 (2) 镜 柱：直立于镜座上的短柱，支持显微镜的其它部分。 (3) 镜 臂：弯曲成马蹄形的部分，便于手持，下端与镜柱相连接的地方有一个倾斜关节，可使镜臂倾斜，便于观察。 (4) 载物台：自镜臂下端向前伸出，放置标本用的平台，其中央有一个园孔，叫通光孔。台 上有一移动器（老式的左右各有一个压片夹），用以固定和移动标本。 (5) 镜 筒：和镜臂上方连接的园筒部分。有的显微镜镜筒内有一抽管，可适当抽长，一般长度是160-170mm。镜筒上端装有目镜，下端有一个可转动的园盘，叫物镜转换器（或叫物镜旋转盘），其上装有2-4 个物镜。 (6) 调焦器：为镜壁上两种可转动的螺旋，一大一小，能使镜筒上下移动，调节焦距。大的叫粗调焦器，升降镜筒较快，用于低倍镜对焦；小的叫细调焦器，升降镜筒较慢。 1.2 光学部分由接目镜、接物镜、反光镜、聚光器等四部件组成。 (1) 接目镜：装于镜筒上方，由两组透镜构成，接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像 再放大成为一个虚像。接目镜上刻有5×，8×，10×，15×，25×等符号，表示放大倍数。 我们所观察到的标本的物像，其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积。如接物镜 是10×，接目镜是8×，其物像的放大倍数是10×8＝80 倍。可在接目镜内两个透镜间的 光栏上可装一根剪短的毛发，做为指针，用以指示要观察的材料。 (2) 接物镜：装在镜筒下端物镜转换器的孔中，一般的显微镜有 2-4 个接物镜镜头，每个镜 头都是由一系列的复式透镜组成的，其上也有放大倍数记号，有4×，10×，40×及100×。 4×及10×接物镜是低倍镜，40×是高倍镜，100×是油镜。低倍镜常用于搜索观察对象及 观察标本全貌，高倍镜则用于观察标本某部分或较细微的结构，油镜则常用于观察微生 物或动植物更细微的结构。 (3) 聚光器（集光器）：位于载物台（通光孔）下方，由两块或数块镜组成，它能将反光镜 反射来的光线集中以射入接物镜和接目镜，有的聚光器可升降，便于调光，集光器下有 一可伸缩的园形光圈，叫虹彩光圈，可调集光器口径的大小和照射面，以调节光线强弱 （有的显微镜只有遮光极而无集光器）。光线过强时，可缩小虹彩光圈。 (4) 反光镜：是显微镜观察时获得光源的装置，位于显微镜镜座中央，一面为平面镜，一面 为凹面镜。转动反光镜，可使外面光线通过集光器照射到标本上。使用时，光线强用平 面镜，光线弱用凹面镜。 2、显微镜的使用方法 （1）取好光源（调光） 用显微镜观察标本前，先要取好光源。首先把显微镜放在自己左肩一侧台前，镜座距桌 边约两寸，镜臂朝自己，镜筒朝外。用手转动物镜转换器，使低倍接物镜和镜筒成一直线， 正对通光孔。用左眼从接目镜向下注视，同时用手拨动反光镜，让镜面对着光源，当看到圆 形镜界（视野）呈现光亮而均匀的时候即调好光了，如视野阴暗不明，则需再调节反光镜和 集光器，直到视野明亮均匀为止。 若为自带电源，则在使用前打开电源开关，逐步调节光亮度旋钮，直至亮度合适为止。 (2) 观察 将要观察的玻片标本放在载物台通光孔的中央，玻片标本两端用压片夹夹紧，再用手沿 顺时针方向旋转粗调节器，把镜筒徐徐降到物镜头差不多接近玻片标本（约半厘米）为止（从 侧面观察下降镜筒）。然后左眼观察，边观察边用调节器将镜筒徐徐上升（逆时针方向旋转 粗调节器）直到发现物象，观察清晰为止。如果观察部分不在视野中心，可移动玻片标本到 视野中心，再上下转动粗调节器至物象清晰为止。 如果要观察视野内某部分更细微的结构，则需要用高倍镜观察，首先要把观察的部分移 至视野中心，然后移动物镜转换器换上高倍镜（使正对通光孔）（使用镜头转化器，不要直 接扳动镜头），再用粗调节器徐徐将镜筒距离调整，至视野中出现物象，然后用细调节器调 节到看清物象止。如光线太弱，可放大虹彩光圈的口径或调节光亮度旋钮。 高倍镜下观察的标本，如果放大倍数还不够，可用油镜，换用前，同样要先在高倍镜下 观察，把要观察的部分放在视野的正中央。观察到清晰的物象之后，在盖玻片上表面的中央 滴一小滴香柏油，再换上油镜头，使油镜头与香柏油接触，然后由目镜观察。一边观察，一 边用手稍移动细调节器（切忌用粗调节器）以看清物象。用油镜观察完毕后，转开油镜，必 须用擦镜纸点二甲苯擦去镜头上的香柏油。下降镜筒，直立反光镜，使光学部件的光