疟原虫血片制作及染色-1.ppt

疟原虫血片制作与染色;电子邮箱：zxt_423@163.com 办公室：疟疾防制科 0879-2141182 手机 QQ血膜制作 血膜染色 影响染色效果的因素 ;血膜制作（血膜分类）;厚血膜 用血量约为4μl～5μl,涂制成直径0.8 ～ 1cm的厚血膜,由于在制备过程中红细胞已溶解，疟原虫在形态上仍可分辨，但胞浆和胞核不可避免地形成一定程度的固缩。受影响较大的有大、裂殖体的形态。 由于厚血膜与薄血膜相比血量大，须查范围小，节省时间，阳性检出率较高。厚血膜能查出疟原虫数是薄血膜的15～25倍。所以，我们推荐疟疾诊断（门诊检验及现场普查）应以检查厚血膜为主。;薄血膜 用血量约为1-1.5μl，涂制成2cm宽×2.5cm长面积的薄血膜。由于在制备过程中，血片通常经甲醇固定，使红细胞及其内疟原虫的形态保持完整，适用于对疟原虫虫种的鉴定。 由于用血量少，为保证检测的敏感性，常耗时较多，不适用于大规模调查。特别在医院的检验室，由于要求在短时间内作出诊断，因而极有可能出现漏诊。; 血膜制作（取血时间）;血膜制作（取血时间）;血膜制作（取血时间）;血膜制作（工具准备）; 血膜制作（取血操作）;厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约4-5微升血量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转2~4圈，再回到圆心收起，涂成直径0.8~1cm大小圆形厚血膜。水平放置，务必使血膜厚薄均匀，过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求。;血膜制作（涂片操作）;;;;血膜制作（涂片操作）; 厚、薄血膜的位置 每张载玻片上可做1个薄血膜和1个厚血膜，如图;各种不同的疟疾血片涂制法：;血膜制作（涂片操作）;血膜制作的注意事项;血膜制作的注意事项;血膜制作的注意事项;血膜染色一、染液的种类及染色原理;血膜染色（一）染液的种类;血膜染色（二）染色的原理;血膜染色（二）染色的原理;血膜染色（二）染色的原理;血膜染色（二）染色的原理;血膜染色（二）染色的原理;血膜染色（二）染色的原理;吉氏染色血片外观; 1、吉氏染液的配制： 这是目前最常用的疟原虫染色剂，它具有方便???染色效果稳定的优点，也是我们推荐的染色方法。 将吉氏粉5g置于研钵中，加入少量甘油充分研磨，然后边加边磨，至甘油250ml加完为止，倒入500ml有塞玻璃瓶中。在研钵中加入少量甲醇，洗掉剩余部分，倒入瓶内，再次加甲醇，洗后再倒入瓶中，至甲醇250ml洗清研钵中甘油为止。塞紧瓶塞，充分摇匀，置室温内，每天用力摇动溶液5分钟，3天后即可使用。 也可在带有紧口瓶塞的硬质玻璃瓶中放入约50个玻璃珠（直径3 ~5mm），用玻璃漏斗把甘油灌入瓶中，再把吉氏粉放入漏斗中，用甲醇缓慢地把所有染料粉冲入瓶内，塞紧瓶塞，置于室温内，每天用力摇动5分钟，3天后即可使用。;吉氏染液染色方法： 先用甲醇固定薄血膜，待干后进行染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚血膜溶脱血红蛋白，然后才进行染色。 成批血片染色：将已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入2%吉氏染液稀释液（2毫升原液加中性蒸馏水98毫升稀释均匀即成），同时对厚薄血膜染色30分钟，然后用清水注入染缸将染液通过溢出方式洗去，再用清水浸洗1-2次，干净后将血片标本（血膜面朝下）插于晾干板上，待干后镜检。 ;单张血片染色：薄血膜经固定干燥后，用中性蒸馏水（或娃哈哈矿泉水）1ml，加吉氏母液1~2滴，混合均匀后滴入血片标本上，染色10~20分钟，然后用清水轻轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。;2、瑞式染液的配制：; 瑞氏染液的染色方法：;（四）影响染色效果的因素;（四）影响染色效果的因素;（四）影响染色效果的因素;（四）影响染色效果的因素;（四）影响染色效果的因素;（四）影响染色效果的因素;（四）影响染色效果的因素;如果你染色的质量不高应该做些什么？;谢谢