寻骨风筋骨康保健液的毒理学与药效学研究..docVIP

寻骨风筋骨康保健液的毒理学与药效学研究 寻骨风筋骨康保健液源自老中医验方，由寻骨风、乳香、伸筋草、接骨木、川穹等（配方保密）具有祛风除湿、活血通络、消肿镇痛作用的中药材为原料，经提取、浓缩等工艺精制而成。用于因风寒湿邪、劳损引起的颈肩腰膝关节疼痛，筋骨疼痛，风湿疼痛，骨质增生人群。为探讨寻骨风筋骨康保健液的药理作用,保证用药安全,笔者对该制剂进行了皮肤急性毒性试验、皮肤刺激性试验和药效学研究。 1 材料与方法 111 实验材料 寻骨风筋骨康保健液(北京京珠草本生物联合千草堂生物在老中医验方基础上，历经10余年科研攻关研制);骨质增生一贴灵(河南羚锐制药厂);TF光热测痛仪(中国医学科学院药物研究所);昆明种小鼠、W istar大鼠及家兔(均由延边大学医学院动物科提供)。 112 实验方法 11211 动物预处理 在正式实验前,取W istar大鼠9只,体重(200+-20)g,将大鼠随机分成3组,分别给予寻骨风筋骨康保健液4, 2, 1 g,结果大鼠未出现异常反应或死亡,故以下实验只设一个高剂量组。11212 皮肤急性毒性实验 取W istar大鼠60只,体重均约为(200?20)g,雌雄各半,试验前1 d对称脱去脊柱两侧毛发,面积共约40 cm2,将大鼠随机分为A1、A2、B1、B2和对照组1、对照组2,每组10只。给药前将A2、B2和对照组2大鼠制作破损皮肤模型。A1、A2组脱毛区给予寻骨风筋骨康保健液, B1、B2组脱毛区给予骨质增生一贴灵的基质,两对照组不给予任何药物。将受试物4 g(相当于拟临床用量的55倍),分别与大鼠正常皮肤和破损皮肤接触24 h,连续观察7d,分别观察动物正常皮肤和破损皮肤短期内接触受试物所产生的全身及局部毒性反应。破损皮肤模型的制作:在给受试物前用无菌针头在脱毛区划出/#0形擦伤,以划伤表皮而不伤真皮、有轻度渗血为[2, 3]。11213 皮肤刺激性实验 取家兔6只,体重210~215 kg,雌雄各半,随机分两组,试验前一天对称脱去脊柱两侧毛各约50 cm2,脊柱右侧脱毛区涂骨质增生一贴灵1 g作对照,左侧脱毛区涂寻骨风筋骨康保健液1 g,用纱布及胶布固定,每天换药1次,连续7 d,观察末次给药后72 h内用药局部有无红斑、水肿等异常情况。试验结果按表1进行刺激反应评分,计算平均评分值。刺激强度评价[2]:平均分值0152,无刺激性; ~2109,有轻度刺激性; ~6100,有中度刺激性; 6100,具有强刺激性。 表1 皮肤刺激反应评分标准 分 刺激反应 分值刺激反应 分值 红斑水肿 无红斑0. 00 无水肿0. 00 勉强可见1. 00 勉强可见1. 00 中等红斑2. 00 皮肤隆起轮廓清楚2. 00 严重红斑3. 00 水肿隆起约1 mm 4. 00 紫红色斑并且4. 00 并且范围扩大 有焦痂形成 11214 药效学实验 采用辐射热刺激甩尾法[4]。将小鼠固定于鼠筒内,一光束经凸透镜聚焦后照射于鼠尾中、下1/3交界处,测定启动光源至鼠尾急速摆动的时间,即甩尾潜伏期,亦称痛阈。取体重为18~22g、痛阈约为6 s (即除外痛阈3 s或10 s者)小鼠40只,雌雄各半,平均分为4组,实验组?和实验组ò分别给予115和310 g的复方骨质增生贴剂,实验组ó给予骨质增生一贴灵310 g,空白组涂基质310 g,连续给药3 d,于第3天给药后30, 60, 90, 120 min测定小鼠的痛阈。 2 结果 2.1 皮肤急性毒性实验结果 A1、B1、对照组1三组正常皮肤的大鼠均无死亡,全身及用药局部未见明显毒性反应。A2、B2、对照组2三组皮肤破损的大鼠中,A2组死亡3只, B2组死亡1只,对照组2无死亡。所有未死亡大鼠的体重、皮肤、四肢活动和进食、排泄等均正常,口、眼、鼻无异常分泌物;对死亡大鼠进行尸检,无肉眼可见病变。根据化学物质急性毒性分级标准[5]判定寻骨风筋骨康保健液对正常皮肤无毒,骨质增生一贴灵对破损皮肤具微毒性。 212 皮肤刺激性实验结果 末次给药后72 h,骨质增生一贴灵对正常皮肤和破损皮肤刺激反应评分平均#393# nthracene in rats and angiogenesis in the rabbit cornea comparison withmedroxyprogesterone acetate (MPA)[J]. Cancer-lett, 2000, 154(1): 63-691 [4] GimbroneM A, Cotran R S, Leapman S B,et al1Tumor growth and neovascularization: an experimentalmodelusing the rabbit