植物细胞工程重点..docx

绪论：生物技术：以生命科学为基础，利用生物体系和工程学原理，生产生物制品和创造新物种的一种综合技术。植物细胞工程：指在植物细胞水平上进行的遗传操作。植物细胞工程就是应用植物细胞生物学和分子生物学的理论和技术，在细胞水平上离体培养或遗传操作，以达到快速繁殖、改良品种或生产更多更好的植物产品的工程学科。植物细胞工程的内容研究植物器官、组织、细胞在离体培养时需要的有机营养、无机营养、植物激素、温度、湿度、光照等环境条件以及发育阶段和基因等的遗传操作。植物细胞工程内容可分为：器官培养，胚胎培养，组织培养，原生质体培养。延伸内容：植物脱毒培养、突变体筛选、细胞杂交、超低温冷冻储藏和人工种子等。植物细胞的全能性：每个植物细胞在适合条件下具有发育成完整植物个体的潜在能力。原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。（1）受精卵的全能性最高（2）受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。分化：细胞在形态、结构和功能上发生永久性的适度变化的过程。脱分化：有高度分化能力的组织或器官产生愈伤组织的过程。再分化：脱分化后的细胞再次分裂、分化并形成不同组织、进而构成器官和植株的过程。愈伤组织：当将离体组织或器官放在培养基上进行离体培养事，这样离体组织或器官就会进行细胞分裂，形成一种高度液泡化的呈无定形的薄壁细胞，称为愈伤组织。外植体：指用于植物培养的接种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质体等植物培养条件：基本培养基、适宜的植物激素、适宜的温度空气、无菌环境、适合的pH 、适时光照等。胚状体: 指植物细胞、组织或器官的离体培养中，起始于一个非合子细胞，并经过胚胎发育过程分化出的类似胚一样的细胞群。胚状体产生的四种方式：1.直接在器官上发生、2.培养物先形成愈伤组织，再由愈伤组织分化成胚状体、3.在花药培养中，由小孢子发育成胚状体、4.在单细胞和原生质体培养中，先由细胞行程一个胚性细胞团，再由胚性细胞团上的细胞发育成胚状体诱导胚状体途径的优点：1数量多2.速度快3.结构完整植物细胞工程的应用：1.快速繁殖2.快速繁殖实现工厂化育苗特点：繁殖快，性状稳定，整齐一致，无病虫害，周期短，周年生产。3.种苗脱毒（茎尖培养可以得到无病毒苗木）4.细胞育种(1) 利用培养变异，筛选优良突变体(2) 利用细胞融合技术，克服远缘杂交不亲和性。4.药用植物的工厂化生产第一章：实验室设计：应选择采光好、通风好、环境干净的地点，以利于培养的顺利进行和降低培养过程的污染率。植物组织培养的实验室，通常包括通用实验室，接种室，恒温培养室，检查培养情况并做记录的细胞学实验室。对玻璃器皿要求：1.耐腐蚀；耐高温、高压 2.透明度好；3.便于接种。第二章：培养基的成分：1.无机营养物（无机盐）2.碳源和能源3.维生素类4.氨基酸及有机附加物（氨基酸、维生素、肌醇、天然复合物）5.植物生长调节物质6.琼脂7.活性炭无机营养物（无机盐）：大量元素 C H O N P S K CA Mg Cl微量元素 Fe Mn B Zn Mo Cu CoN：蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，在植物生命活动中占有重要的位置。满足培养物对氮的需求，胚胎发生所需要的元素之一P：磷脂的主要成分，参与植物生命活动中核酸以及蛋白质合成、光合作用、呼吸作用以及能量储存、转化与释放等重要的生理过程K：对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系。Mg、S、Ca：叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂，对核蛋白体结构具有稳定作用；S：含S氨基酸的蛋白质的组成成分。Ca：构成细胞壁的成分，对细胞分裂，稳定质膜结构有显著作用，此外，Ca及钙调素在细胞信号转导中起重要作用。铁：氧化酶的组成成分，又是叶绿素形成的必要条件。硼：与蛋白质合成、糖类运输有着密切的关系；铜：某些氧化酶的成分，能够促进离体根的生长；锰：与植物的光合、呼吸代谢；钼：参与氮素的代谢；氯：光合作用水光解的活化剂。VB1: 促愈伤组织产生，提高活力VB6: 促根生长　Vpp（烟酸）: 与代谢和胚发育有关Vc: 防组织褐变肌醇：促进愈伤组织生长、胚状体和芽的形成，对组织细胞繁殖、分化的促进作用天然复合物：提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质和生长激素等碳源和能源：主要是蔗糖、葡萄糖。作为离体组织赖以生长的碳源，使培养基维持一定的渗透压植物生长调节物质：1.生长素类种类：IBA—吲哚丁酸；IAA—吲哚乙酸；NAA—萘乙酸；2,4-D---2,4-二氯苯氧乙酸。作用　诱导愈伤组织和根分化，促进细胞分裂和伸长。配制生长素可溶解在稀NaOH中或溶于乙醇。2.细胞分裂素类（CTK）种类：6-BA---苄氨基腺嘌呤、Kt---激动素、2-iP---异戊烯腺嘌呤、ZT-玉米素