植物生理學实验讲义.docVIP

植物生理学实验 （第一版） 目　录 实验一 质壁分离法测定植物组织的渗透势……………………2 实验二 植物体内硝态氮含量的测定……………………………4 实验三 叶绿素a，b含量的测定…………………………………5 实验四 赤霉素对水稻α--淀粉酶的诱导形成…………………6 实验五 植物呼吸强度的测定……………………………………7 实验六 种子活力的快速测定—氯化三苯基四氮唑(TTC)法及红墨水法………8 实验七 丙二醛含量的测定………………………………………11 实验一 质壁分离法测定植物组织的渗透势 [实验目的] 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的测定 [实验原理] 原生质层（细胞膜、原生质、液泡膜）具有选择透过性，近似于半透膜，一个成熟的植物细胞就是一个完整的渗透装置：当外界溶液浓度大于细胞液浓度时(高渗溶液），细胞失水，发生质壁分离；当外界溶液浓度小于细胞液浓度时（低渗溶液），细胞吸水；当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，当外界溶液浓度等于细胞液浓度时（等渗溶液），植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。细胞水势等于细胞液的渗透势等于外界溶液渗透势。 将植物组织置于对其无毒害的一系列不同浓度的溶液里处理一定时间，然后镜检发生质壁分离的情况，细胞的等渗浓度将界于刚刚引起初始质壁分离的浓度和不能引起质壁分离的浓度之间。代入公式即可计算渗透势。 [材料、器材与试剂] 1 实验材料 洋葱表皮 2 实验仪器 显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，刀片，培养皿，记号笔，滴管。 3 实验试剂 分别配制0.50、0.45、0.4、0.35、0.30、0.25、0.20、0.15、0.10mol/L的蔗糖溶液，贮9个试剂瓶中。称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1mol/L(母液)。再配制成下列各种浓度： 0.50mol/L：吸母液25ml+水25ml 0.45mol/L：吸母液22.5ml+水27.5ml 0.40mol/L：吸母液20.0ml+水30.0ml 0.35mol/L：吸母液17.5ml+水32.5ml 0.30mol/L：吸母液15.0ml+水35.0ml 0.25mol/L：吸母液12.5ml+水37.5ml 　　0.20mol/L：吸母液10.0ml+水40.0ml 　　0.15mol/L：吸母液7.5ml+水42.5ml 　　0.10mol/L：吸母液5.0ml+水45.0ml [方法与步骤] 1. 取6套干净清洁的小培养皿，用记号笔编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层，盖好皿盖。 3.选用有色素的洋葱鳞片的外表皮迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，每个培养皿中放材料3个左右，使其完全浸没，浸泡20分钟左右。 4. 到时后，取出表皮，放在载玻片上，滴一滴相同浓度的蔗糖，盖上盖玻片，在显微镜下观察质壁分离的细胞数如果所有的细胞都产生质壁分离现象，则取低浓度溶液中的制片做同样的观察，并记录质壁分离的相对程度。 5. 在实验中确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁角隅上分离的最低浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。 6. 在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次，直到有把握为止。在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。 ???求得C1按下式计算渗透势 ψπ =-iRTC1 ψπ为细胞渗透势(bar)；R为气体常数(0.083*105L.Pa/mol·K)；T为绝对温度(273+t℃)；i解离系数，蔗糖为1；C1 等渗溶液的质量摩尔浓度，单位是mol/kg； 实验二 植物体内硝态氮含量的测定 [实验目的] 硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。 [实验原理]????在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。 [材料、器材与试剂] 1 实验材料 白菜叶片。 2 实验仪器 722型分光光度计、电子天平。??? 3 实验试剂 （1）??500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200ml。?（2）?5%水杨酸一硫酸溶液 称取5克水杨酸溶于100ml，浓硫酸中（密度为1