植物生物技术概论(南农)描述.docx

南京农业大学植物生物技术概论阐述基因工程的原理和科学意义基因工程原理：对不同生物的遗传物质——基因，在体外进行剪切、组合和拼接，使遗传物质重新组合，然后通过载体(质粒、噬菌体、病毒等)转入微生物、植物或动物细胞内，进行复制、转录、翻译表达的操作，使所需要的基因在细胞中表达．产生出人类所需要的产物或组建成新的生物类型。科学意义：1.不受亲缘关系的限制，可实现动物、植物和微生物间遗传物质的交流，从而充分利用自然界存在的工作遗传物质2.加快育种进程，缩短了进化时间。3.使人能对生物体进行定向构造。4.有效地打破有利基因和不利基因的连锁，充分利用有用基因。基因工程的四大要素：目的基因、工具酶、载体、受体。1973年基因工程诞生的元年理论上的三大发现：（1）首先，40年代发现了生物的遗传物质是DNA。（2）50年代搞清楚了DNA的双螺旋结构和半保留复制机理。（3）60年代确定了遗传信息的传递方式。确定遗传信息是以密码方式传递的，每三个核苷酸组成一个密码子，代表一个氨基酸。技术上的三大发明：(1)限制性核酸内切酶的发现、 DNA连接酶的发现(2)基因工程载体的发现(3)逆转录酶的发现基因工程研究内容应包括以下几个主要步骤：（1）从现有的生物有机体基因组中，经过酶切消化或PCR扩增等方法，获得带有目的基因的DNA片段。（切）（2）在体外，将带有目的基因的外源DNA片段连接到具有选择标记的载体分子上，形成能够自主复制的重组DNA分子。（连）（3）将重组DNA分子转移到适宜的受体细胞，并使其一起增殖。（转）（4）从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆。（选）（5）由筛选出来的受体细胞克隆，提取出已经得到扩增的目的基因，供进一步分析研究使用。（扩）（6）将分离到的目的基因克隆到表达载体上，导入受体细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的物质。（表）相关概念结构基因(structural gene)是可以转录成为各种RNA(如rRNA、tRNA、snRNA)直接行使功能，或者转录成信使RNA(mRNA)然后翻译成多肽链，最终形成各种功能蛋白质和酶。从广义上讲，任何一种能够调节或限制其他基因活性的基因都可叫做调节基因(regulatory gene)，一般情况下则是指基因产物参与调节别的基因活性的基因(如阻遏基因等)。首先转录成mRNA，然后由mRNA翻译成阻遏蛋白质或激活蛋白质，通常也称为转录因子或反式作用因子。它们通常结合到结构基因的非编码区的顺式元件上起调控作用。管家基因和奢侈基因:具有相同遗传信息的个体细胞间其所利用的基因并不相同，有的基因活动是维持细胞基本代谢所必需的，而有的基因则在一些分化细胞或受到外界刺激的细胞中活动。前者称为管家基因(house-keeping gene)，如编码核糖体蛋白、线粒体蛋白、糖酵解酶等的基因；而后者被称为奢侈基因(1uxury gene)移动基因插入序列(IS)的转座因子。直至1980年夏皮罗(Shapiro)等人证实了可移位的遗传基因存在，说明某些基因具有移动性。转座子也称易位子，是由两个重复顺序夹着一个或多个结构基因组成。有的转座子的重复序列就是IS。转座子也和IS一样，能从一个位点转座到另一个位点，或从一个复制子转座到另一个复制子。转座子属于可移动的遗传因子—移动基因。除了转座因子外，病毒和质粒都是染色体外的可以移动的遗传物质，都必须依赖宿主而复制。假基因是多基因家族中的成员，因其碱基顺序发生某些突变而失去功能，不能表达或表达异常，生成无生物活性的多肽。假基因DNA顺序可在相应基因名称之前加φ表示。假基因的五个显著特点：基因的结构发生突变、没有内含子、具有与mRNA的poly(A)尾的相应结构、两侧有顺向重复序列、随机出现在非正常的位置上。植物组织培养在农业上的应用 1、快速繁殖某些稀有植物或有较大经济价值的植物2、植物脱毒3、植物种质资源的保存、挽救濒于灭绝的植物4、通过花药和花粉培养获得单倍体植株、缩短育种年限5、胚胎培养的应用在远源杂交中，杂交后形成的胚珠往往在未成熟状态时，就停止生长，不能形成有生活力的种子，因而杂交不孕，这给远缘杂交造成极大困难。远缘杂交中，由于生理上和遗传上的障碍而不能杂交成功，可采用试管受精加以克服，即将母本胚珠离体培养，使异种花粉在胚珠上萌发受精，产生的杂种胚在试管中发育成完整植株。6、细胞融合通过原生质体融合，可部分克服有性杂交不亲和性，而获得体细胞杂种，从而创造新种货育成优良品种。7、培养细胞突变体的应用培养细胞处在不断分生状态，它就容易受培养条件和外加压力（如射线、化学物质）的影响而产生诱变，从中可以筛选出有用的突变体，从而育成新品种。8、用于遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等9、利用组