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融合基因的构建与原核表达作者孙万军杜建芳徐东刚邹民吉王金凤蔡欣王颖王嘉玺艾辉胜摘要克隆表达可生物素化的的重链胞外区是制备肽四聚体的先决条件本研究构建重组融合基因的表达载体以制备四聚体根据已报道的序列设计特异引物利用逆转录聚合酶链反应方法从已鉴定为基因型的健康人白细胞中克隆重链胞外区的基因拼接上依赖生物素蛋白连接酶的可生物素化序列构建的原核表达载体在大肠杆菌中进行表达结果表明成功扩增出融合基因并测序证实构建的可在大肠杆菌中高效表达融合蛋白表达量占菌体总蛋白的以包涵体的形式表达经洗涤变性后以柱层析纯

HLAA*0201BSP融合基因的构建与原核表达 nbsp;作者:孙万军, 杜建芳,徐东刚, 邹民吉, 王金凤, 蔡欣, 王颖, 王嘉玺, 艾辉胜 【摘要】nbsp; 克隆表达可生物素化的HLA-A*0201的重链胞外区是制备HLA-A*0201-肽四聚体的先决条件。本研究构建重组HLA-A*0201-BSP融合基因的表达载体,以制备HLA-A2四聚体。根据已报道的序列设计特异引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从已鉴定为HLA-A*0201基因型的健康人白细胞中克隆HLA-A*0201重链胞外区的基因,拼接上依赖生物素-蛋白连

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