2013年培训班讲课8-17例析.pptVIP

微生物学检验：  从规范送检到结果解读 王慧珠 首都医科大学附属北京地坛医院细菌室 whz660527@ 前言 引起人类感染的微生物种类繁多，生物学特性各异，没有一种检测方法能检测所有的微生物，更没有一种培养基能解决临床所有问题 主动了解患者病史，留取合格的检测标本，根据临床症状和初步诊断选择适当的检测方法， 从中找出与感染相关的可能的病原菌 ，才能更好地为临床提供服务 检验与临床的合作和交流非常重要 内容提纲 临床细菌学检验标本送检原则 正确评价不同标本的细菌检测结果 提高真菌检测能力 病例分享 细菌学检验标本送检原则 在使用抗菌药物之前采集标本 避免消毒剂污染标本 严格执行无菌操作 正确指导患者留取标本 及时送检 鼓励送检有价值的标本 什么是有价值的标本？ 组织和无菌体液（血、骨髓、、脑脊液、关 节液、胸腹腔穿刺液）标本进行细菌学检验， 有很高的诊断价值，鼓励多送检。 尿培养有助于尿路感染的诊断，鼓励送检。 痰培养诊断价值有限，在考虑下呼吸道感染 （CAP、HAP）时可以送检。 口腔和肠内容物、直肠周围脓肿、褥疮、呕吐物等价值较低，建议少送检。 痰培养 痰培养经常被用于诊断下呼吸道感染 引起感染的病原体很多，能在人工培养基上生长的病原体较少。 感染菌受到抗生素攻击、白细胞吞噬、黏液包裹等因素的影响，活力下降，难以培养。 引起下呼吸道感染最常见的机制是吸入定植菌，人体口咽部定植菌的种类和数量随机体的健康状况（如免疫功能、抽烟、酗酒）和所处环境（如住院，入托等）的不同而有所不同。 痰培养结果必须结合临床情况综合评估，价值有限。 痰标本采集方法 ?以晨痰为佳。用清水反复漱口，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的带盖的容器中，尽快送检。痰量极少者可用雾化吸入加温至45℃的100g/LNaCl水溶液，使痰液易于排出。要求采到肺深部的痰液，不要唾液。 痰涂片 痰涂片 痰涂片的质量分级 分类 WBC/L 鳞状上皮细胞/L A 25 10 B 25 10-25 C 10 25 分类中C类不做培养，要求重新留取标本 A跟B类为合格标本 临床疗效与药敏结果不一致原因 痰培养的细菌为定植菌。 痰标本中某些占少数的非致病菌在体外培养时适应体外培养条件大量繁殖，而某种占多数的治病菌营养要求高，不适应体外培养条件，生长缓慢。 痰和支气管吸取物培养的评价 革兰染色中占优势的菌做鉴定和药敏 草绿色链球菌—排除 S. pneumoniae （肺链） 酵母—仅排除Cryptococcus neoformans （隐球菌） 金葡、革兰阴性杆菌 （优势菌，跟临床沟通） 无论量大小，都要鉴定霉菌、分枝杆菌和奴卡菌等 肺泡灌洗液（BALF）检测 标本要求：鳞状上皮细胞≤1%，可作为未受明显污染的“合格”标本。 中性粒细胞＞80%，特别是发现细胞内细菌，可判断为肺部细菌性感染。如果BALF液细胞成分涂片的革兰染色结果阳性，且每个油镜下显示1种或以上微生物，那么该标本培养肯定阳性。因此BALF液沉淀物进行革兰染色和抗酸染色检查，对肺部感染的病原菌和结核分枝杆菌的检查有较大意义。 肺泡灌洗液（BALF）检测 普通涂片及细菌培养 真菌培养，同时做25℃跟37℃培养 抗酸染色及结核菌培养 六胺银染色 核酸检测（PCR）查PCP及结核分枝杆菌 肺泡灌洗液革兰氏染色 肺泡灌洗液革兰氏染色 35℃培养6天 革兰氏染色 抗酸染色 PCP（ 六胺银染色） 正规血培养要以”套”采血 成人的血培养应两套瓶 （需氧瓶 + 厌氧瓶为一套），10ml/瓶。两套指两个采血部位。 先需氧瓶，然后入厌氧瓶内。真菌、绿脓杆菌、窄食单胞菌只长在需氧瓶内 用药前，或抗菌药低谷时抽，尽快送检，如不能立刻送检，置于室温 对已经使用抗菌药物治疗的患者 ，用含活性炭等的抗菌药物吸附瓶 2-5天内不必重复取血，只有可疑为持续性菌血症：如心内膜炎、导管相关 sepsis时，才要有间隔地(1h至24h)几次取血监测、捕 捉、指导治疗。 Riley J.A., HeiterB.J., BourbeauO.O. Comparison of recovery of blood culture isolates from two BacT/ALERT FAN a