实验1大肠杆菌的培养与分离报告.ppt

生物选修（1）生物技术实践IB模块 生物技术概述 1-1 什么是生物技术 1-2 传统生物技术 1-3 现代生物技术 1-1什么是生物技术 生物技术=生物工程 应用自然科学及工程学原理，以微生物体、动物体、植物体或其组成部分作为生物反应器将物料进行加工，以提供产品来为社会服务的技术。 1-2 传统生物技术 传统生物技术指主要通过微生物的发酵来生产商品.如:酱、醋、酒、面包、奶酪、酸奶等 1-3 现代生物技术 一般而言，現代生物技术可以分成以下五种： 一、细胞工程 二、发酵工程 三、蛋白质工程 四、酶工程 五、基因工程 一、细胞工程 按照人们的需要和科学设计改变细胞的遗传基础，并通过细胞(组织)培养，细胞杂交(融合)，核移植和胚胎移植等技术，重组细胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。 细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程 植物细胞工程:植物组织培养和植物细胞杂交 动物细胞工程:细胞培养、细胞融合、胚胎移植、核移植、胚胎分割、干细胞等 二、发酵工程 微生物的无氧呼吸叫发酵 1.定义：利用DNA重组技术对不同生物的遗传基因，根据人們的意愿，进行基因的切割、拼接及重新组合，再转入生物体內，产生出人们所期望的产物或创造出具有新的遗传特征的生物类型。 三、蛋白质工程 蛋白质工程主要包括了解合成蛋白质的DNA编码序列、蛋白质的分离纯化、蛋白质的序列分析和结构功能分析、蛋白质结晶和结构力学分析等。 四、酶工程 酶工程即利用基因工程等手段，改变酶或蛋白质的折叠方式、空间结构、催化活性和稳定性等 五、基因工程 1.定义：又叫DNA重组技术，即针对不同生物的遗传基因，根据人们的意愿，进行基因的切割、拼接及重新组合，再转入生物体內，产生出人们所期望的产物或创造出具有新的遗传特征的生物类型。 基因工程的条件 （1）工具酶 （2）基因的分离 （3）基因的载体 （4）受体 选修1需学习的实验 实验1 大肠杆菌的培养和分离 实验4 果汁中的果胶和果胶酶 实验5 加酶洗衣粉的使用条件很效果 实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 实验8 果酒及果醋的制作 实验10 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 实验11 植物的组织培养 一、基础知识 一基础知识 朊病毒（蛋白质病毒） 4细菌的外形与大小 细菌：单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染色（革兰氏染色）后显微镜观察 细菌的构造 细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质、 拟核，细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。 *细胞壁 成分：肽聚糖 细胞壁有哪些功能？ ①固定细胞外形； 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 5细菌的营养物质 碳源 氮源 水 无机盐 生长因子 即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶 6细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。 自养菌（autotroph） 异养菌（heterotroph） 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 选择培养基 鉴别培养基 伊红美蓝乳糖培养基 3.培养基内所含的基本物质 一般营养物质(1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐 其他物质 pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 (2)碳源 可作为碳源的物质有: 含碳无机物: 、 、 含碳有机物： (3)氮源 可作为氮源的物质有: 含氮无机物： 、 、 、 含氮有机物： 3培养基配制原则： 营养要协调 目的要明确 PH要适宜 从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作 （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。 灭菌 概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 方法：a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌 二、实验操作 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 2纯化大肠杆菌 3将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱中培养12h和24h后，观察并记录 涂布分离