液质联用技术的原理及在药学研究中的应用1详解.ppt

影响LC/MS测定的因素 pH影响 检测正离子，酸化样品 检测负离子，碱化样品 常用的pH调节溶剂 乙酸 pH 3~4 甲酸 pH 2~3 三氟乙酸 pH 1~2 氨水溶液 甲酸铵 乙酸铵 溶液和缓冲剂的组成 ESI离子源 APCI源以上均可用 不适合：不挥发性盐：磷酸及盐、硼酸及盐、氯化钠、十二烷基硫酸钠、强离子对试剂等 常用 可用 不适合 甲醇 丙醇 苯 乙腈 丁醇 甲苯 异丙醇 二氯甲烷 烷烃 丙酮 三氯甲烷 环烷烃 乙醇 水 四氯化碳 样品浓度的影响 样品浓度过低：检测不出 样品浓度过高： 污染离子源、仪器管路（特别是表明活性剂） 产生簇离子或多聚体-谱图复杂化 产生空间电荷效应-谱图歧变 2、基质效应 基质效应（matrix effect）是由于样品中存在干扰物质，对响应造成直接或间接的影响。LC-MS分析时，内源性物质使待测物的离子化效率降低或者增强。 产生原因：待测组分与样品中基质成分在雾滴表面离子化过程的竞争。结果显著的降低或增强目标离子的生成效率及离子强度，进而影响测定结果的精密度和准确度。使得信号的响应值产生较大变异。 LC-MS分析时基质效应客观存在，并随样品不同而不同。影响基质效应的因素很多，如样品、基质、样品前处理过程、色谱条件、色谱分离效果、流动相、离子化等。 优化色谱条件 改进前处理方法纯化样品 改变离子化方式 内标定量法 样品前处理 过滤 （0.45um滤膜）、超滤（3K、10K、30K等） 溶剂萃取（去除杂质Na+、K+等） 高速离心（去除不溶物） 透析（常用于蛋白纯化、除盐） 固相萃取（除杂质、盐、浓缩样品、更换溶剂等） 分子筛（常用于蛋白纯化） 色谱分离（正相、反相、亲和） 联用时的主要问题 难挥发和/或不稳定样品的离子化 流速不兼容 流动相不兼容：不挥发缓冲盐、添加剂等 APCI-LC/MS氨基甲酸盐类化合物的分析 mAU min 5 10 15 20 25 20 40 60 80 UV 254 nm Tomato extract spiked with 11 carbamates Norm. 40000 80000 120000 EIC m/z 222 MS TIC carbofuran 药物中的杂质含量低、来源广、结构多与主成分类似，必须选择合适的分析技术进行研究。 LC-MS 联用技术结合了色谱的高分离能力和质谱的高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点，在食品分析、环境分析和医药研究等许多领域已得到了广泛应用。 随着联用技术的日趋完善，以及色谱、质谱新技术的应用，LC-MS 联用技术成为杂质分析中广泛采用的方法。 在杂质谱分析中：对药物中存在的已知杂质进行鉴别的同时也能对未知杂质进行结构推导 在工艺杂质分析中：可以直接鉴定杂质的化学结构，从而为原料药的质量控制、合成工艺的改进提供依据 在降解产物研究中 ：对药物在实际储藏条件下产生的降解产物进行分析，可为药物的储藏、运输及使用的整个过程中的存放条件提供依据 * * by Li Ping * We are taking the first step in broadening our LC/MS product portfolio by introducing a true benchtop ion trap LC/MS (n) system. The ion trap LC/MS system heavily leverages the strengths of our LC/MSD technology. Secondly, we will be introducing two new benchtop single quadrupole instruments at Pittcon 2000. This will include a higher price, higher performance instrument and lower price, standard performance instrument. We also have under investigation the development a time of flight and triple quadrupole programs Overall, we recognize that multiple types of MS technologies complement one another and are needed to better serve various applications and analytical problems. V. Ramachandran