{新}第七章 细菌和病毒的遗传.ppt

一、细菌的结构 单细胞生物，大小不一，一般长1- 2μm，宽0.5μm，为一层或多层膜或细胞壁所包围。部分细菌还有某些特殊的结构，如鞭毛、伞毛、荚膜等。 细菌的细胞核没有核膜，其中的染色体是一个很长的共价闭合环状双链DNA分子，长度从250-3500μm不等，一般不与蛋白质结合。 多数细菌细胞在细胞核外还有一个或多个能自主复制的小型环状DNA。这些DNA分子对细菌的生长并非必需，但可赋予细菌某些特性，如抗药性、抗盐性、抗噬菌体侵染等。这些小分子DNA称为质粒（plasmid）。 细菌能在成分十分简单的培养基上生长，这种培养基叫基本培养基。细菌在这种培养基上能合成生长所必须的各种有机物。单一细胞经过分裂而增殖，大致20分钟繁殖一代，逐渐形成肉眼可见的菌落。 二、病毒的结构 病毒为非细胞结构，没有自身的代谢机能，不能独立地生长和繁殖，必须寄生在活细胞中，利用活细胞的营养物质合成新的病毒后代。繁殖迅速，每小时可增殖百倍。 病毒个体微小，形态多样，结构简单，仅含一种核酸（DNA或RNA）和一个蛋白质外壳。依其遗传物质的性质，可以分单链DNA、单链RNA、双链DNA和双链RNA病毒等四种类型。按照它们所感染的细胞类型可分为感染细菌、真菌及藻类的菌类病毒，以及感染动植物的动物病毒和植物病毒。 遗传学研究中应用最广泛的是感染细菌的病毒，又称为噬菌体(bacteriophage)。依其与宿主细胞的相互关系，可以分为烈性噬菌体(virulent phage)和温和噬菌体(temperate phage)两大类型。 四、细菌和病毒的研究方法 1．单细胞分离 菌液→稀释→涂布在固体培基→单个细胞分离→形成肉眼可见菌落。 2．影印法测定变异 采用影印法测定细菌是否发生变异以及发生何种变异。 细菌变异主要有形态特征变异和生理特性变异。 形态特征变异：菌落大小、形状、颜色 生理特性变异： （1）营养缺陷型：丧失合成某种营养物质的能力，在基本培养基上不能生长。 原养型（野生型）：能够在基本培养基上生长。 （2）抗性突变：抗药性和抗感染型。 病毒的研究方法： 1. 获得变异 亚硝酸、羟胺、乙基黄酸乙酯（EES）等化学药剂诱导发生变异。 常见变异： 寄主范围变异：野生型（h＋）：感染B菌株，产生半透明斑；突变型（h）：感染B和B/2菌株，产生透明斑。 噬菌斑突变：野生型（r＋）：产生正常斑，小而边缘模糊；突变型（r）：产生突变斑，大而边缘清晰。 所以：h+r感染B菌株产生半透明大斑；hr+感染B和B/2菌株，产生透明小斑。 2．杂交试验 双重感染分析子代噬菌体中重组型的频率。 一、细菌遗传物质的转移形式 二、细菌遗传物质转移的共同特点 3. 转化的过程 （3）联会(synapsis)，与外源DNA片段的整合 部分二倍体发生交换只有偶数（双交换、四交换）交换才有意义，既不破坏受体DNA的环状结构，又将外源DNA置换到受体染色体中。而奇数交换将受体环状DNA打开成线性DNA，重组转化子不能成活。 任意两基因发生共同转化的前提下： ala-pro：亲型转化子：ala+pro+ 重组型转化子：ala+pro- ala-pro+ ala-arg：亲型转化子：ala+arg+ 重组型转化子：ala+arg- ala-arg+ pro-arg：亲型转化子：pro+arg+ 重组型转化子：pro+arg- pro-arg+ 四、细菌的接合（conjugation） 对实验结果的解释 对Lederberg-Tatum实验解释的质疑 实验推论 Hayes等对“雄性”细菌和“雌性”细菌的解释 F因子的实质 3. 高频重组菌株（Hfr） 高频重组与F因子的关系 4. F’因子和性导(sexduction) 1.中断杂交法作图 Hfr与F－混合培养不同时间取样 搅拌中断杂交 稀释 含链霉素完全培养基 杀死Hfr 抗str菌落 影印培养鉴定azi+ton＋gal＋lac＋各基因转移时间。 混合培养9分钟，出现azi＋； 混合培养11分钟，出现azi＋和ton＋； 混合培养18分钟，出现azi＋、ton＋和lac＋； 混合培养24分钟，4种原养型都出现。 o azi ton lac gal F 9