【2017年整理】冬虫夏草的研究进展与发展趋势.docVIP

冬虫夏草的研究进展与发展趋势 靳朝霞 杨少辉 李明刚 姜洪州* （南开大学生命科学学院 天津 300071） 摘要：冬虫夏草是一种名贵的药用真菌,由于其自身独特的药用价值而成为各国研究的热点。本文综述了近年对冬虫夏草人工培养、深层发酵、无性型的分离与鉴定、化学成分、药理作用等方面的研究进展，并阐述了其研究趋势。 关键词：　冬虫夏草；无性型；深层发酵；药理作用 0 引言 冬虫夏草[Cordyceps sinensis(Berk) Sacc.]，又名虫草、冬虫草、夏草冬虫，是一种虫生真菌，属麦角菌目Clavicipitales、麦角菌科Clavicipitaceae的虫草属Cordyceps。冬虫夏草具有多种药理功能，并含有抗癌活性物质，，，，(后期腐生)在虫草蝙蝠蛾(Hepialus Armorieanus)幼虫体内生长繁殖，，，5－6月份由头部长出子座，，，，， 1冬虫夏草无性型的研究 冬虫夏草是一种子囊菌，其生活史可分为分生孢子阶段（无性型）和子囊孢子阶段（有性型）。在人工培养、液体发酵等实际生产中通常运用冬虫夏草菌的无性阶段，因此其菌种的正确鉴定至关重要，引起科学家高度关注。 1.1冬虫夏草菌种的分离 冬虫夏草菌前期寄生后期腐生，加之生长缓慢，分离获得冬虫夏草的纯菌株较为困难，因此获取纯菌种是冬虫夏草人工培育及无性型研究的关键。目前常用的分离途径主要有以下三种： 从子囊孢子分离菌种。首先在产地挖取新鲜虫草，，，，，，，，，1～2个月能长出菌落[2]。 从子座分离菌种。选择子座饱满、完整的冬虫夏草标本经酒精表面消毒后，用无菌刀片切取子座可孕部及内菌核(注意不要触及虫体肠道及体壁)，取绿豆大小的组织块置于平板培养基上培养至长出菌落[3]。 1.2 冬虫夏草无性型的鉴定 近年来，，10个属的30多种。曾报道的无性型主要有虫草多毛孢Hirsutella hepiti、中国被毛孢Hirsutella sinensis、蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyces hepiali、中国拟青霉Paecilomyces sinesis、蝙蝠蛾被孢霉Mortierella hepiali、虫草头孢霉Cephdosporium sinensis、蝙蝠蛾柱霉Scytalidium hepiale、中国弯颈霉Tolypocladium sinensis、中国金孢霉Chrysosporium sinensis、葡萄穗霉属(Stachybotry)等[4]。但这几个菌种中中国拟青霉和蝙蝠蛾被孢霉经验证发现不可能是冬虫夏草的无性型[5]。 面对如此众多的菌种和名称，引发了关于冬虫夏草无性型的标准、无性型的种类以及如何确定冬虫夏草的无性型等问题的争议。目前已有证据表明，中国被毛孢（Hirsutella sinensis X. J. Liu， Y. L. Guo， Y. X. Yu W. Zeng 冬虫夏草无性型的鉴定。冬虫夏草的鉴定方法很多，早在1941年小林义雄（Kobayase）就提出了确定无性型判定的五条标准：①具有虫草子座的一部分或分枝产生的无性产孢结构；②在形成虫草子实体的菌丝体上同时形成无性产孢结构；③在长出虫草子实体的同一寄主昆虫体上出现的无性产孢结构；④在同一地区长虫草子实体的同种昆虫的不同虫体上同时观察到无性产孢结构；⑤虫草的子囊孢子接种在培养基上能形成无性产孢结构。无性型分离比较传统可靠的方法是子囊孢子分离,但对于一些难以人工培养的虫草菌则不适用。对于子囊孢子难以萌发的种,可以试着利用组织分离的方法获得无性型,但此方法难以排除误定的可能；同时工作量大,需多批次多途径的进行分离。 利用子囊孢子的微循环产孢(microcycle conideation)现象鉴定虫草无性型是一种简便可靠的方法。微循环产孢是丝状真菌中分生孢子萌发后无(或仅有极微弱的)菌丝生长阶段的一种重复产孢现象。利用微循环产孢鉴定虫草无性型，，，， 王伟等总结出一套鉴定虫草无性型的方法，，，，，(rocket line immunoelectrophoresis)证明两者具有相同的抗原性和交叉血清学关系；⑤纯培养物与天然虫草在药理上具有一致性[12]。这些间接的方法尽管不能最终鉴定冬虫夏草有性、无性的真实关系，但这些方法交替使用并严格相互验证， DNA指纹图谱鉴定法。李增智等从青海的冬虫夏草子实体上分离到中国被毛孢，，96%，，，，，，，，20世纪80年代初，，，1988年首次获得了与天然冬虫夏草形态特征完全相同的人工冬虫夏草。俞永信等从天然虫草中分离得到冬虫夏草菌，，，，4项基本技术：①菌种用真正的无性阶段菌株(含无性孢子)或用成熟的天然子囊孢子作接种体；②寄主蝙蝠蛾的饲养技术；③侵染途径；④模拟产地的生态环境，，，，，，，，，(%)葡萄糖4，酵母粉l，蛋