微生物限度检查操作规程摘要.doc

西安利君精华药业有限责任公司GMP管理文件 题 目 微生物限度检查操作规程 共 29 页 文件编码 JH—CZ—ZL—114—R01 第 1 页 制 定 审 核 批 准 制定日期 审核日期 批准日期 颁发部门 公司办 颁发数量 4 生效日期 分发单位 化验室、质检办、质量管理部、质量副总 1.目的：建立微生物限度检查操作规程，保证检验检验结果的准确性。 2.范围：用于本公司非规定灭菌制剂及原辅料内包材受到微生物污染程度的检查，包括染菌量及控制菌的检查。 3.责任：质检员执行，质检办主任检查，质量管理部经理监督。 4.执行标准：中国药典2005年版二部附录XIJ 盐酸丁卡因胶浆 及原辅料内包材 细菌数 ≤10个/克或ml 霉菌及酵母菌数 不得检出/克或ml 铜绿假单胞菌 不得检出/克或ml 金黄色葡萄球菌 不得检出/克或ml 大肠埃希菌 不得检出/克或ml 鱼腥草素钠栓及原辅料内包材 细菌数 ≤100个/克或ml 霉菌及酵母菌数 ≤10个/克或ml 铜绿假单胞菌 不得检出/克或ml 金黄色葡萄球菌 不得检出/克或ml 红霉素栓及原辅料内包材 细菌数 ≤1000个/克或ml 霉菌及酵母菌数 ≤100个/克或ml 铜绿假单胞菌 不得检出/克或ml 金黄色葡萄球菌 不得检出/克或ml 大肠埃希菌 不得检出/克或ml 固体制剂及原辅料内包材原料药 细菌数 ≤1000个/克或≤100个/ML 霉菌及酵母菌数 ≤100个/克 大肠埃希菌 不得检出/克 题 目 微生物限度检查操作规程 共 29 页 文件编码 JH—CZ—ZL—114—R01 第 2 页 5.设备、仪器及用具: 5.1.无菌室：净化工作台、天平、乙醇棉、乙醇灯、火柴、大小橡皮乳头等。 5.2. 恒温培养箱（30－35℃）、生化培养箱（25－28℃）、微波炉、康氏振荡器、匀浆仪（3000－8000r／min）、恒温水浴、电热干燥箱（250－300℃）、电冰箱、高压蒸汽灭菌锅，菌落计数器、显微镜、366nm紫外灯、 天平、PH系列比色计。 5.3.玻璃器皿：锥形瓶（250－300ml）、研钵、培养皿、量筒（100ml）、试管、吸管（1ml、10ml）注射器、注射针头、载玻片、盖玻片、带盖玻璃消毒缸（玻璃器皿用前洗涤干净再用牛皮纸包扎好，121℃高压灭菌30分钟，烘干备用）离心机（500－4000/min）、薄膜过滤装置、微孔滤膜直径约50mm孔径0.45±0.02um。 5.4.大小橡皮乳头（放于干净带盖的容器中，并定期用75％乙醇溶液浸泡。 5.5.无菌衣、帽、口罩、手套（洗净后配套用牛皮纸包严灭菌）。 5.6.接种环、乙醇灯、乙醇棉球、灭菌剪刀、灭菌镊子、灭菌锥、不锈钢药匙、试管架、火柴、记号笔、白瓷盘、洗手盆、陶瓷盖、灭菌称样纸，实验记录纸等。 6.试液及培养基： 6.1. 消毒液：0.2％苯扎溴铵溶液（供洗手，擦拭操作台面 用）; 5％石碳酸溶液 75％乙醇溶液 题 目 微生物限度检查操作规程 共 29 页 文件编码 JH—CZ—ZL—114—R01 第 3 页 6.2.稀释剂和试剂 6.2.1. 无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液(PH7.0)；取磷酸二氢钾3.56g，磷酸氢二钠7.23g，氯化钠4.30g蛋白胨1.0g，加水使溶解成1000ml分装，121℃高压灭菌。 6.2.2无菌磷酸盐缓冲液（PH7.6）：取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释成200ml分装，121℃高压灭菌。 6.2.3无菌磷酸盐缓冲液（PH7.8）：甲液：取磷酸二氢钠35.9g,加水使溶解成500ml；乙液：取磷酸二氢钠2.76g,加水使溶解成100ml；取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀分装，121℃高压灭菌。 6.2.4 0.9%无菌氯化钠溶液：取氯化钠9g，加水使溶解成1000ml分装,121℃高压灭菌。 6.2.5无菌对氨基苯甲酸溶液：取对氨基苯甲酸0.1g加入含10ml水的带塞试管中，121℃高压灭菌。 6.2.6无菌聚山梨酯－80氯化钠溶液：取聚山梨酯80ml 加0.9％氯化钠溶液使成100ml，121℃高压灭菌。 6.2.7欧波试液(靛基质试液）：取对二甲氨基苯甲醛1.0g加入95％乙醇95ml,充分振摇，使完全溶解后，取浓盐酸20ml徐徐滴入，边加边振摇，以免骤热导致溶液色泽变深，置冰箱保存，备用。 6.2.8甲基红试液：取甲基红0.1g，95％乙醇300ml，蒸馏