(分析实验原理.docVIP

二、样品预处理 1、样品预处理的原则：1）消除干扰因素；2）完整保留被测组分；3）使被测组分浓缩。 2、样品预处理的方法：有机物破坏法、蒸馏法、溶剂抽提法、色层分离法、化学分离法、浓缩法(br) 1）有机物破坏法在食品分析中应用较广，主要是利用高温或强氧化剂使有机物破坏，而被测的元素以简单的无机化合物的形式出现，从而使其易于被测定。包括干法灰化、湿法灰化、紫外光分解法、微波消解法。(br) 2）蒸馏法是利用被测物质中各组分挥发性的不同来进行分离的方法。可用于除去干扰组分和被测组分的抽提。分为常压蒸馏、减压蒸馏、水蒸气蒸馏。(br) 3）溶剂抽提法是使用无机溶剂如水、稀酸、稀碱溶液，或有机溶剂如乙醇、乙醚、石油醚、氯仿、丙酮等从样品中抽提被测物质或除去干扰物质的方法。适用于固体（浸提）或液体（萃取）。(br) 4）色层分离法又称色谱分离法，是一种在载体上进行物质分离的一系列方法的总称。(br) 5）化学分离法包括磺化法和皂化法、沉淀分离法、掩蔽法。(br) 3、几种常用的样品预处理方法：1）干法灰化法——a、500~600摄氏度灼烧；b、为了缩短灰化时间、促进灰化完全，防止元素挥发损失，常向样品中加入硝酸、过氧化氢；c、添加氧化镁、碳酸盐、硝酸盐等，它们可以同灰分混杂，使炭粒不被覆盖，但要做空白实验；d、优点——有机物破坏彻底，操作方便，使用试剂少；适用于除砷、汞、铅等以外的金属元素的测定，因为温度高，这几种金属易挥发损失。 2）湿法灰化法——a、强酸、强碱、加热；b、特点——加热温度较干法低，减少了金属挥发逸散的损失，但消化时会产生大量有毒气体，需在通风橱进行；消化初期应控制火力，防止产生的泡沫冲出瓶颈，造成损失。 三、实验 1、食品中还原糖的测定（碱性铜盐法[直接滴定法、高锰酸钾滴定法]、铁氰化钾法、碘量法、比色及酶法） 掌握直接滴定法 1）原理：试样经处理除去蛋白质后在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，由于酒石酸铜具有氧化性，加热条件下可以将还原糖氧化成醛酸，而本身还原成氧化亚铜沉淀，使溶液呈蓝色，由于所用指示剂为氧化还原指示剂，当还原糖将二价铜全部还原后，过量的还原糖则可以把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变成无色，即为滴定终点。 2）样品预处理（看实验册！！） 3）步骤：①样品预处理：取样→提取液（50ml水）→250ml锥形瓶→乙酸锌溶液、亚铁氰化钾溶液各5ml→定容、摇匀，静置30min→过滤（弃去初滤液）→滤液备用；②碱性酒石酸铜溶液的标定：碱性酒石酸铜甲乙液各5ml，水10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→从滴定管放入9ml葡萄糖标准溶液→加热（2min内沸腾）→准确沸腾30min→用葡萄糖标准溶液以1滴/秒的速度进行滴定→蓝色刚好褪去时记录葡萄糖标准溶液的消耗量（ml）；③样品溶液预测：碱性酒石酸铜甲乙液各5ml，水10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→加热（2min内沸腾）→以先快后慢的速度从滴定管中滴加试样溶液，保持溶液沸腾状态，待颜色变浅，以1滴/2秒的速度滴定，直至溶液蓝色刚好消失为终点，记录样液消耗量（应与标定碱性酒石酸铜溶液时说消耗的葡萄糖标准溶液体积接近，若太高则要适当稀释才进行正式滴定，过低则可以直接加10ml的样液而不加10ml水，在用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液的体积之差，那么一会正式滴定则加这差值）④试样溶液测定：碱性酒石酸铜甲乙液各5ml，水10ml于150ml锥形瓶（玻珠3粒）→从滴定管滴加比预测体积少1ml的试样溶液至锥形瓶→加热（2min内沸腾）→趁沸继续以1滴/2秒的速度滴定→直至溶液蓝色刚好消失为终点，记录样液消耗量（平行三次） 4）主要试剂及作用 ①乙酸锌-亚铁亚铁氰化钾溶液：作为澄清剂，主要是利用乙酸锌和亚铁亚铁氰化钾反应生成的氰亚铁酸锌沉淀带走或吸附干扰物质（主要是蛋白质），这种澄清剂除蛋白质能力强，但脱色能力弱，适合于色泽较浅、蛋白质含量较高的样液澄清，如乳制品、豆制品。 ②酒石酸铜溶液：作为反应物之一参与反应，在颜色变化中其作用。 ③次甲基蓝：氧化还原指示剂，颜色指示作用。 5）计算方法X=[m1/(m2*V*1000)/250]*100，m1——10ml酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，等于标定酒石酸铜溶液的葡萄糖标准溶液的质量浓度（mg/ml）*标定时消耗的葡萄糖标准溶液的体积（ml）；m2——样品质量（mg）；V——测定时平均消耗样品溶液的体积（ml）；250——样品液总体积（ml） 6）注意事项 ①碱性酒石酸铜甲乙液应分别储存，需要用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。 ②为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰，在碱性酒石酸铜乙液中加入