实验须知[精选].ppt

实验须知 (biochemistry) 基本操作 一、玻璃仪器的洗涤与清洁 （一）新购玻璃仪器的清洗：新购来的玻璃仪器，其表面附有游离质，可先用肥皂水洗侧，再用流水冲洗，浸泡 1 - 2 % Hcl 中过夜，再用流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2 - 3 次，在干燥箱中烤干，或晾干备用。 一、玻璃仪器的洗涤与清洁 （二）使用过的玻璃仪器清洗：1 ．一般玻璃仪器：如试管、烧杯、锥形瓶等，先用自来水洗刷至无污物，再选用大小合适的毛刷故洗衣粉或肥皂水，将器皿内外壁细心刷洗，再用自来水冲洗干净，洗至容器内壁光洁不挂水珠为止，最后用蒸馏水冲洗2 一3 次，倒置在清洁处晾干，急用时可用干燥箱烤干。 一、玻璃仪器的洗涤与清洁 2 ．容量仪器：吸量管、滴定管、容量瓶等，使用后应立即浸泡于清水中，勿使沾污物质干涸，并及时用流水冲洗干净，稍干后再用铬酸洗液浸泡数小时，然后用自来水反复冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗2 一3 次，晾干备用。 一、玻璃仪器的洗涤与清洁 3 ．比色杯：用毕立即用自来水反复冲洗干净，如洗不净时，可用盐酸或适当溶剂冲洗，再用自来水冲洗干净．切忌用试管刷或粗糙的布或纸擦洗，以免损坏比色杯透光度，亦应避免用较强的碱液或强氧化剂清洗，洗净后倒置晾干备用． 二、吸量管的种类和使用 （一）分类生化常用的吸管有三类：1 奥氏吸量管： 供准确量取0.5mL 、1mL 、2 mL液体时用。每根吸管上只有一个刻度，放液时必须吹出最后残留在吸量管尖端的液体。 二、吸量管的种类和使用 2 移液管：供准确量取5mL 、10mL 、25mL 等较多体积液体时用。每根吸量管上只有一个刻度，放出液体流毕后，将吸量管尖在容器内壁上继续停留15 秒，注意不要吹出尖端内的最后部分． 二、吸量管的种类和使用 3 刻度吸量管：供量取10ml以下的任意体积的液体时用。每根吸量管上都有许多等分刻度，一般刻度包括尖端部分，欲将所量取液体全部放出时，须将残留管尖的液体吹出。在吸量管的上端常标有吹字，此类吸量管又称全流出式。 （二）吸量管的使用 1 选择：使用前先根据需要选择适当的吸量管，刻度吸量管的总容量最好等于或稍大于最大取液量．临用前要看清容量和刻度． 2 执管：用拇指和中指（辅以无名指），拿住吸管上部，用食指堵住管上口和控制液流．刻度数字要对向自己。 四、溶液的混匀 （一）旋转混匀法用手持容器，使溶液作离心旋转，适用于未盛满液体的试管或小n 器皿，如锥形瓶。旋转试管时最好用手腕旋转。 （二）指弹混匀法左手持试管七端，用右手指轻轩弹动试管下部，使管内溶液作旋涡运动 五、过滤 是分离沉淀和池液的一种方法，可用于收集滤液，收集或洗涤沉淀。生化实验的过德，操作与化学相同，应注意以下几点：（一）制备血滤液等实验过滤时，要用干掳纸而不能用水把滤纸先弄湿，因为湿滤纸会影响血液稀释的体积。（二）折叠滤纸的角度应与漏斗相合，使滤纸上缘能与漏斗壁完全吻合，不留缝隙。一般采用平折法（即对折后再对折）。 五、过滤 （三）向漏斗中加溶液时最好使用玻棒引流，倒人速度不要太快，不得使液面超过浊纸上缘。 （四）较粗的过滤可用脱脂棉或纱布代替滤纸，有时可用离心沉淀法代替过滤法 六、离心机的使用方法 欲使沉淀与母液分开，过滤和离心都可达到目的，但当沉淀粘稠，或颖粒大小能通过滤纸，总容最太少又稿定量测定时，使用离心沉淀法比过滤法要好．使用离心机前，应先栓查离心机转动状态是否平稳，以确定离心机的性能，检查套管与离心管大小是否相配，套管是否铺好软垫（用棉花、或橡皮）．套管底部有无碎玻片或漏孔（碎玻片必须取出，漏孔须修补好）。 六、离心机的使用方法 检查合格后，将一对离心管放人一对套管中，然后连交管一起分置粗天平两侧，用滴管向较轻的一侧离心管与套管之间加水，直至天平两侧彼此相等为止。将各对已平衡的套管连同内容物放投于离心机内，两个等重的管必须放于对称位置．放妥后，接通电源开关，逐步扭动转速旋钮，缓慢增加离心机转速，直至所濡的转速。达规定时间后．将转速旋钮逐步回零，待离心机停稳后，取出离心管． Ⅱ 吸光分析 ㈠ 原理 光的本质是电磁波的一种，有不同的波长。 ﹤400nm的光线 （紫外线） 400～750nm的光线（可见光） ﹥750nm的光线（红外线） * 3 取液：另一只手捏压橡皮球，将吸量管擂入液体内（不得悬空，以免液体吸入球内），用橡皮球将液体吸至最高刻度上端 1 一2cm 处，然后迅速用食指按紧管上口，使液体不致于从管下口流出。 4 调准刻度：将吸量管提出液面，吸粘性较大的液体时，先用毽纸擦干管尖外壁，然后用食指控制液流使之缓慢下降至所需刻度（此时液体凹面、视线和刻度应在同一水平面曰，立即按紧吸量管上口． 5 放