徐昊-D301R固定化酶催化生产生物柴油最优条件[精选].doc

分类号 编号 烟 台 大 学 文 经 学 院 毕 业 论 文（设 计） D301R固定化酶催化生产生物柴油最优条件 Optimal conditions of immobilized enzyme D301 R catalytic production of biodiesel 申请学位：生物工程 学士 系 别：食品与生物工程系 专 业：生物工程 班 级：文生085--1 姓 名：徐昊 学 号：200890519135 指导老师：姜爱莉（副教授） 2012年5月5日 烟台大学文经学院 D301R固定化酶催化生产生物柴油最优条件 Optimal conditions of immobilized enzyme D301 R catalytic production of biodiesel 姓 名： 徐昊 导 师： 姜爱莉 2012年5月5日 烟台大学文经学院 [摘要] 以D301R大孔树脂为载体进行脂肪酶的固定，通过单因素和正交实验优化固定化条件，得到高活性固定化脂肪酶并对其催化生产生物柴油的最优条件进行研究，结果表明：最优固定条件为：酶/树脂10%（w/w），加水量30%（w/w），异辛烷中4 ℃下固定5 h；催化反应的最优条件为：加酶量67 mg/g,加水量67 μL/g,正己烷0.5 mL/g,甲醇分三次流加，40 ℃下进行反应；反应后最高酯化率为67.24%。固定化酶具有良好的酯化能力。 关键词 大孔树脂；脂肪酶；固定化；生物柴油 Abstract：In this paper ,lipase was immobilized onto macroporous resin D301R. The immobilized conditions were optimized though single-factor test and orthogonal design. The Optimal conditions and esterifying capability of the immobilized lipase were systematically studied. The results showed that the optimum immobilized conditions were as follows: 10% lipase (enzyme/resin, w/w) was immobilized in isooctane microenvironment contained 30% water at 4 ℃ for 5 h. The optimal conditions for catalytic reaction were as follows: 67mg/g enzyme concentration (enzyme/ acid grease, w/w) add in reaction system contained 67 μL/g water and 0.5mL/g n-hexane, methanol added in three times, at 40 ℃. The highest esterification rate after reaction was 67.24%. Immobilized lipase displayed good esterification ability . Key words：macroporous resin；lipase；immobilization；biodiesel目 录 1 文献综述 1 1.1 生物柴油简介 1 1.2 生物柴油生产方法 1 1.3 脂肪酶的简介 2 1.4 固定化酶简介及固定化方法 3 1.4.1 吸附法 3 1.4.2 共价结合法 4 1.4.3 交联法 4 1.4.4 包埋法 4 1.5 游离脂肪酶与固定化脂肪酶的比较 4 1.6 国内外研究进展 5 1.7 立题意义及背景 6 2 材料与方法 7 2.1 实验材料 7 2.1.1 实验仪器 7 2.1.2 实验原料及试剂 7 实验方法 8 2.2.1 固定化载体预处理 8 2.2.2 固定化载体制作流程 8 2.2.3 脂肪酶的固定化 8 2.2.4 脂肪酶水解活力的测定 8 2.2.5 固定化条件优化 9 2.2.6 固定化酶催化酯化反应条件优化 9 2.3 分析方法 9 2.3.1 酸价的测定 9 2.3.2 酯化率的计算方法] 10 2.3.3 酶