2010419第3次_2章.pptVIP

* * * * 变偶性或摆动性——反密码子5’端的碱基与 密码子的第三位配对不严格 核糖体是rRNA 与几十种蛋白质的复合体，有大、小两个亚基构成。含有合成蛋白质多肽链所必需的酶、起始因子（IF）、延伸因子（EF）、释放因子（RF）等。rRNA只有4-5种，但占细胞RNA的大部分 。 原核的核糖体（70S）= 30S小亚基 + 50S大亚基 30S小亚基: 16S rRNA + 21种蛋白质 50S大亚基: 23S，5SrRNA + 34种蛋白质 真核的核糖体（80S）= 40S小亚基 + 60S大亚基 40S 小亚基: 18S rRNA + 33种蛋白质 60S 大亚基: 28S，5.8S，5SrRNA + 45种蛋白质 核糖体（ribosome）与核糖体rRNA 原核生物的两种RNA: 16S rRNA和5S rRNA 的结构 核糖体的结构 核糖体有4个基本功能 1. 容纳mRNA，并能沿着mRNA由5’-3’ 移动，由tRNA解读其密码； 2. 氨基酰位点（A位点），可结合氨基酰-tRNA（AA-tRNA）； 3. 肽酰基位点（P位点），可结合肽酰基-tRNA（肽-tRNA）； 4. 脱氨基酰tRNA的出口位(E位点) ; 5. 肽酰基转移酶中心，是形成肽键的位点等。 氨基酸活化protein activation 肽链合成的起始 initiation 肽链合成的延伸 elongation 肽链合成的终止与释放 termination and release 合成多肽的输送和加工 transport and modification 蛋白质分子的折叠 folding (2)蛋白质的生物合成过程 氨基酸活化生成氨酰-tRNA 翻译起始时，第一个氨基酸一般是甲硫氨酸，其氨基要甲酰化成为甲酰甲硫氨酸，予以保护。 甲酰FH4 甲酰基 Met tRNAfmet fMet-tRNA合成酶 fMet-tRNA 氨基酸与tRNA的 连接方式 原核生物肽链合成的起始阶段是在GTP和起始因子（Initiation Factor）的参与下，核糖体30S亚基，fMet- tRNAfMet，mRNA和50S亚基结合，组成起始复合物的过程。主要包括5个步骤： （1）30 S亚基与起始因子IF3 结合； （2）30 S亚基与mRNA结合，形成30 S-IF3-mRNA复合物； （3）fMet- tRNAF 与起始因子IF2以及GTP结合，生成fMet- tRNAF -IF2-GTP； （4）在起始因子IF1的参与下，fMet- tRNAF-IF2-GTP与30 S-IF3-mRNA结合生成30 S起始复合物。在此30 S起始复合物中，fMet- tRNAF上的反密码子正好与mRNA上的起始密码子AUG结合； （5）50 S亚基与上述30 S起始复合物结合，形成完整的70 S核糖体。同时放出IF1，IF2，IF3 ，并使GTP水解生成GDP和Pi。在此70 S核糖体形成时，fMet- tRNAF 位于70 S核糖体的“P”位（肽酰基位），而它的“A”位（氨酰基位）是空位。 蛋白质合成起始 新的氨基酸-tRNA的进位依赖Tu-Ts因子和GTP的协助 氨酰基tRNA进入A位 肽键的形成由肽酰基转移酶催化（此酶具有核酶的活性） 肽键的形成 原核生物肽链的延长 核糖体沿着mRNA 5’——3’方向移位，多肽链沿着N端向着C端延伸，须有EF-G因子和GTP参与，空载的tRNA从E位点离开 进位 转位 成肽 合成终止 氨基酸进位，肽链形成和延伸，核糖体沿着mRNA的5’—3’方向移位，循环往复，新合成的肽链由N端向着C端不断延长，直至mRNA上出现终止密码，相应的肽链释放因子RF1（对应UAA、UAG），RF2（对应UAA、UGA）占据A位。肽链的合成终止，并从核糖体上释放。核糖体大、小亚基解聚，并进入下一轮合成。 高效率的蛋白质合成体系 多个核糖体结合在同一条mRNA上，由5’—3’进行翻译，形成多核糖体（polyribosome），以提高翻译的效率 (3)多肽链的修饰和加工 (1)N—端修饰 原核生物修饰时是由肽甲酰基酶除去甲酰基，多数情况甲 硫氨酸也被氨肽酶除去，真核生物中甲硫氨酸则全部被切除。 (2)多肽链的水解切除 水解切除其中多余的肽段，使之折叠成为有活性的酶或蛋白质。如酶原激活 (3)氨基酸侧链的修饰 氨基酸侧链的修饰包括羟化、羧化、甲基化及二硫链的形成等。 (4)糖基化修饰 糖蛋白是细胞蛋白质组成的重要成分。它是在翻译后的肽链上以共 价键与单糖或寡聚糖连