厌氧菌的培养特性__培训课件.ppt

一般不发酵糖类，能液化明胶，产生硫化氢，形成吲哚，不能还原硝酸盐为亚硝酸盐。对蛋白质有微弱消化作用。本菌繁殖体抵抗力与其他细菌相似，但芽胞抵抗力强大。在土壤中可存活数十年，能耐煮沸40～50分钟。对青霉素敏感，磺胺类有抑菌作用。 二）致病性与免疫性 破伤风梭菌芽胞广泛分布于自然界中可由伤口侵入人体，发芽繁殖而致病，但破伤风梭菌是厌氧菌，在一般伤口中不能生长，伤口的厌氧环境是破伤风梭菌感染的重要条件。窄而深的伤口（如剌伤），有泥土或异物污染，或大面积创伤、烧伤、坏死组织多，局部组织缺血或同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染，均易造成厌氧环境，局部氧化还原电势降低。有利于破伤风杆菌生长 破伤风梭菌能产生强烈的外毒素，即破伤风痉挛毒素（Tetanospasmin）或称神经毒素(Neurotoxin)。破伤风毒痉挛毒素是一种神经毒素，为蛋白质，由十余种氨基酸组成不耐热，可被肠道蛋白酶破坏，故口服毒素不起作用。在菌体内的痉挛毒素是单一和一条多肽链，分子量15万。破伤风毒素的毒性非常强烈，仅次于肉毒毒素。破伤风梭菌没有侵袭力 三）微生物学检验 标本采集 检验程序 检验方法和鉴定 五 气性坏疽病原菌 以组织坏死，水肿，产气及全身中毒的严重的急性外伤感染 包括很多-----重点 产气夹膜梭菌 产气夹膜梭菌 生物学性状 形态和染色 培养特性 生化反应 致病性 为革兰氏阳性粗大梭菌，3～4×1～1.5um。单独或成双排列，有时也可成短链排列。芽胞呈卵圆形，芽胞宽度不比菌体大，位于中央或末次端。培养时芽胞少见，须在无糖培养基中才能生成芽胞。在脓汁、坏死组织或感染动物脏器的涂片上，可见有明显的荚膜，无鞭毛，不能运动。 厌氧程度不如破伤风梭菌要求高。在血液琼脂平板上菌落较大、灰白色、不透明，边缘呈锯齿状，多数菌株有双层溶血环，内环是θ毒素的作用，而外环不完全溶血是a毒素所致。不能消化已凝固的蛋白质和血清。 在疱肉培养基中肉渣不被消化，有时呈肉红色。在牛乳培养基中能分解乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同时生成大量气体，将凝固的酪蛋白冲成海棉状碎块。管内气体常将覆盖在液体上的凡士林层向上推挤，这种现象称为“汹涌发酵”，是本菌的特点之一。 能分解多种糖类，如葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和乳糖，产酸产气，不发酵甘露糖或水杨苷，能液化明胶，产生硫化氢， 致病条件与破伤风梭菌相似。产气荚膜梭菌既能产生强烈的外毒素，又有多种侵袭性酶，并有荚膜，构成其强大的侵袭力，引起感染致病。 1．气性坏疽 2．食物中毒 3．急性坏死性肠炎 1．直接涂片镜检 从伤口深部取材涂片，革兰氏染色镜检，可见革兰氏阳性大杆菌，并有荚膜，常伴有其他杂菌，白细胞甚少，形态不规则，这是气性坏疽标本涂片的特点。 2．分离培养与鉴定 取坏死组织制成悬液，接种于血球脂平板上或疱肉培养基中，厌氧培养，观察生长情况。取细菌培养物涂片镜检，并进一步用生化反应鉴定。 3．动物实验 取培养液0.5～1ml给小鼠或家兔静脉内注射，10分钟后杀死动物，置37℃5～8小时。如动物躯体膨胀，即行解剖，可见脏器和肌肉内有大量气泡，尤以肝脏最为明显，称“泡沫肝”。取内脏或心血涂片镜检或分离培养，可发现有革兰氏阳性大杆菌，并有明显荚膜。 无芽孢的厌氧菌 革兰氏阴性的杆菌 革兰氏阳性的杆菌 革兰氏阴性的球菌 革兰氏阳性的球菌 革兰氏阴性的杆菌 ------正常菌群的组成部分 类杆菌属 厌氧性细菌及检验 临床微生物教研室 袁小澎 一定义 有氧条件下不能生长，无氧条件(不是绝对）下才可以生长的一类细菌 1836年Pasteur提出 临床上日益受到重视，60%临床标本存在厌氧菌感染---------------------需要重视 二 分类 1 有芽孢厌氧性细菌 一个梭菌属包括83个种 2 无芽孢厌氧性细菌 40多个菌属，300多个菌 种和亚种 三 感染 分布 原因 临床症状 厌氧菌在正常人体内的分布 厌氧菌 皮肤 上呼吸道 口腔 肠道 尿道 阴道 一芽孢菌 G+杆菌 梭状芽孢杆菌属 二无芽孢菌 （一）G+的杆菌 双歧杆菌 （二） G-的杆菌 类杆菌属 （三）G+的球菌 消化球菌属 （四）G-的球菌 韦荣氏菌属 0 0 0 + 0 0 0 + + + ± + ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ + ± 0