(生化考研.docVIP

第一章 蛋白质结构与功能 第一节 蛋白质的分子组成 1. 蛋白质、元素组成、含氮量（100g样品中蛋白质的含量g%=每g样品含氮克数*6.25*100） 2. 氨基酸分类：（含N量最多的aa，亚aa，无旋光性无立体异构体的aa，含二硫键aa） 组成人体蛋白质的氨基酸均属于L-氨基酸 附: 非极性氨基酸：Ala，Val，Leu，Ile，Pro，Trp，Phe，Met（四种脂肪烃链、一种亚氨基酸、两种杂环、一种含S） 不带电荷的极性氨基酸：Gly，Ser，Thr，Cys，Tyr，Asn，Gln 带正电荷的极性氨基酸：Lys，Arg，His 带负电荷的极性氨基酸：Asp，Glu 口诀：甘丙缬亮异脂链, 丝苏半蛋羟硫添 , 天谷精赖组酸碱 , 脯酪苯色杂芳环 ,天门酰胺谷酰胺 , 都有密码属常见 必需氨基酸：Val，Leu，Ile，Thr，Met，Lys，Phe和Trp（一两色素本来淡些） 3. 氨基酸理化性质 等电点 [ pHpI，aa带阳离子，pHpI时，aa带阴离子，pI=0.5(pK1+pK2)] 紫外吸收[ 最大吸收峰，原因] 茚三酮反应[颜色，最大吸收峰，定量分析] 4. 肽（肽键、二肽、寡肽、多肽、谷胱甘肽） 第二节 蛋白质分子结构 一级结构（定义、作用力） 二级结构（种类、作用力、超二级结构） α-helix结构要点 三级结构（特点、结构域、作用力） 四级结构（亚基、作用力） 第三节 蛋白质结构与功能关系 一级结构与功能关系（一级结构决定蛋白质高级结构） 空间结构与功能关系（Mb与Hb异同点、协同效应、变构效应） 由组织产生的CO2扩散至红细胞，从而影响Hb和O2的亲和力，这称为波尔效应。 第四节 蛋白质理化性质与分离纯化 蛋白质理化性质（等电点、维持胶体稳定性的因素、变性的本质因素、复性、沉淀、双缩脲反应）注：二肽不能参与双缩脲反应 分离纯化（透析、盐析、SDS测蛋白质分子量、层析种类及其原理） 氨基酸序列分析（大致过程，酸水解与碱水解优缺点，酶解、N末端分析方法、C末端分析方法） 酶解：胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶及溴化氢断裂肽链方法 第二章 核酸 第一节 核酸的化学组成 核酸、分类及分布、组成、连接方式、cAMP功能、一级结构 第二节 DNA DNA的二级结构（chargaff规则、双螺旋模型要点、了解Z-DNA等特殊形式） DNA的三级结构（正负超螺旋、核小体） 第三节 RNA mRNA（多顺反子、SD序列、结构特点、功能、） tRNA（一级结构特点、二级结构特点、三级结构、功能） rRNA（含量、真核与原核中rRNA种类、功能） snmRNA (hnRNA、SnRNA、SnoRNA) 第四节 理化性质 紫外吸收 DNA纯品，OD260/OD280=？ ；RNA纯品，OD260/OD280=？ 变性（定义、方法、理化性质变化OD260和黏度、本质、增色效应、Tm及其影响因素） 变性剂：尿素 盐酸胍 β-巯基乙醇作用 复性（定义、退火、减色效应）和分子杂交 第五节 核酸酶及核酶 核酸酶（根据底物分类、根据切割部位分类、eg.蛇毒磷酸二酯酶、牛脾磷酸二酯酶） 核酶（具有催化活性的DNA或RNA） 第三章 酶 第一节 结构与功能 1. 酶定义、分类（蛋白质+核酸）、单体酶、寡聚酶、多酶体系、多功能酶 单纯酶、结合酶（全酶）=酶蛋白+辅助因子（小分子有机化合物和金属离子） →酶蛋白与辅助因子作用 判断：所有酶均含有辅助因子？ 区分金属酶与金属激活酶？ 金属离子的作用？ 小分子有机化合物的作用？ 辅酶、辅基 2. 酶的活性中心（结合基团与催化基团） 必需基团（活性中心的必需基团+活性中心以外的必需基团） 判断：活性中心一定是必需基团，但必需基团不一定是活性中心 第二节 酶促反应特点 1 酶与一般催化剂的共同点 酶的特殊性（高效、特异、可调节） 特异性的类型 2. 机制 中间复合体、诱导契合假说、酶促反应的机制（邻近效应与定向排列、多元催化、表面效应） 第三节 酶促反应动力学 定义及影响因素 1. [S] 影响、米氏方程、Km及其意义、测定方法 2. [E] 影响 3. T 影响 判断：T是酶的特征性常数 4. pH 5. 抑制剂 定义（活性降低但却不引起变性）、抑制剂与变性剂区别（抑制剂具有选择性） 不可逆抑制与可逆抑制（竞争性、非竞争性、反竞争性）的动力学特点、举例 6. 激活剂 酶活性、酶活力单位 第四节 酶的调节 调节对象：关键酶 调节方式：酶活性调节（快速）+酶含量调节（慢速） 1. 酶活性调节 1.1 酶原和酶原激活（定义、意义） 1.2 变构调节（定义、变构酶