清洗消毒灭菌操.pptVIP

食品微生物检验规范操作基础培训 1 清洗、消毒和灭菌操作福建出入境检验检疫局技术中心食品所微生物实验室2010.05 主要内容： § 1　清洗、消毒和灭菌操作 § 2　培养基的制备 § 3　采样和取、制样 § 4　接种、分离纯化 § 5　制片、染色及显微观察 § 6　实验室安全基础知识　 § 1 　清洗、消毒和灭菌操作 1.2　消毒、灭菌 消毒（disinfection）：杀灭物体上病原微生物的方法，但不一定杀死细菌芽胞。 灭菌（sterilization）：杀灭物体上包括芽胞在内的所有病原性和非病原性微生物的方法。 防腐（antisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。 无菌（asepsis）：不含活菌的意思。防止微生物进入机体或物体的操作方法，称为无菌操作或无菌技术。进行微生物实验、外科手术及医疗技术操作等过程，均需进行严格的无菌操作。 消毒灭菌的方法 （一）物理消毒灭菌法 （二）化学消毒法 （一）物理消毒灭菌法 1.热力灭菌法 　　　热力灭菌法分干热灭菌和湿热灭菌两大类。在同一温度下， 后者效力比前者为大，这是因为： （1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （2）湿热的穿透力比干热大； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。水由气态变为液态时释放出的潜热，可迅速提高被灭菌物体的温度。 加热灭菌和加热消毒的方法 干热灭菌法 火焰灭菌法 干燥加热空气灭菌法 高温灭菌 巴氏消毒法 常压下 煮沸消毒法 湿热灭菌法 间歇灭菌法 常规加压灭菌法 加压下 (高压蒸汽灭菌法) 连续加压灭菌法 干热灭菌法 1.焚烧：是一种彻底的灭菌方法，但仅适用于废弃物品或尸体等。 2.烧灼：直接用火焰灭菌，适用于微生物学实验室的接种环、试管口等的灭菌。 3.干烤：鼓风干燥箱灭菌。一般加热至160℃～170℃经2小时。适用于高温下不变质、不蒸发的物品， 如玻璃器皿、瓷器等。 湿热灭菌法 1.煮沸法：1个大气压下，煮沸的水温为100℃，一般细菌繁殖体煮沸5～10分钟即被杀死。细菌芽胞常需煮沸1～２小时，才被杀死。水中加入2%碳酸钠，可提高沸点达105℃，促进细菌芽胞的杀灭。 2.巴氏消毒法（pasteurization）:用较低温度杀灭液体中的病原菌、同时又不影响消毒物品的营养成分及香味的消毒方法。加热61.1～62.8℃半小时即可，常用于牛奶和酒类等的消毒。 在高压蒸汽灭菌前要确保高压锅中的所有冷空气已经排空，否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系，这样会大大降低灭菌效果。 定期对灭菌效果进行监测和验证，可采用： 物理监测法（留点温度计法、热电偶法）； 化学指示剂法（化学指示胶带、指示卡等）； 生物指示法（孢子悬液、孢子条带等）监控高压灭菌 的效果。 2.辐射 利用辐射进行灭菌消毒，可以避免高温灭菌或化学药剂消毒的缺点，所以应用越来越广 。 1.紫外线：紫外线波长为200～300nm时具有杀菌作用，其中以260nm最强。紫外线杀菌机理主要是作用于细菌DNA，使同一条DNA 链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合而形成嘧啶二聚体，因而改变DNA的分子构型，干扰细菌DNA的复制与转录，导致细菌的死亡或变异。紫外线穿透力差，故只适用于空气及不耐热物品的表面消毒。 2.应用β射线作食品表面杀菌，γ射线用于食品内部杀菌。经辐射后的食品，因大量微生物被杀灭，再用冷冻保藏，可使保存期延长。 3.滤过除菌 　　 采用机械方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器。通过过滤，只让液体培养基从筛子中流下，而把各种微生物菌体留在筛子上面，从而达到除菌的目的。这种灭菌方法适用于一些对热不稳定的体积小的液体培养基的灭菌以及气体的灭菌。它的最大优点是不破坏培养基